【临床微生物实验】_克雷伯菌属和志贺菌属.pptVIP

* 菌属名 苯丙氨酸脱氨酶 葡萄糖酸盐或VP 变形杆菌属　★ ＋ － 普罗威登菌属　★ ＋ － 摩根菌属　　★ ＋ － 克雷伯菌属　● － ＋ 肠杆菌属　　● － ＋ 沙雷菌属　　● － ＋ 哈夫尼菌属　● － ＋ 埃希菌属 － － 志贺菌属 － － 沙门菌属 － － 枸橼酸杆菌属 － － 爱德华菌属 － － 耶尔森菌属 － － 肠杆菌科的初步分群 * 克雷伯菌属： 动力阴性、脲酶+ 苯丙氨酸脱氨酶（－） ，葡萄糖酸盐（+） 血平板：粘液型菌落， KIA：AA+－ 肺炎亚种IMViC --＋＋。 * 肠杆菌科鉴定系统（手工、半自动、全自动） API系统 VITEK系统 国内肠杆菌编码系统等等 * 超广谱β-内酰胺酶（ESBLs） 概念：ESBLs是指由质粒介导的能水解青霉素类、头孢菌素类和单环?内酰胺类氨曲南的一类β内酰胺酶。 特点：ESBLs不能水解头霉素类、四代头孢和碳青霉烯类药物，能被克拉维酸、舒巴坦和他唑巴坦等?内酰胺酶抑制剂所抑制； 分布：ESBLs主要见于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和变形杆菌，此外也见于肠杆菌属、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属等其他肠杆菌科细菌、不动杆菌属、假单胞菌属等非发酵菌。 2010年CLSI修改了药敏实验标准：对于产ESBL的肠杆菌科细菌可以根据药敏试验选择三代头孢 * 纸片扩散法检测ESBLS: 项 目 初步筛选试验 表型确证试验 培养基 MH琼脂 MH琼脂 抗生素纸片浓度 头孢泊肟10?g 头孢他啶30?g 头孢他啶30?g 头孢他啶/棒酸30/10?g 氨曲南30?g 和 头孢噻肟30?g 头孢噻肟30?g 头孢曲松30?g 头孢噻肟/棒酸30/10?g 接种 按标准纸片扩散法的规定进行 孵育条件 35?C, 空气 孵育时间 16~18h 结果判读 头孢泊肟?17mm 对2个中任何一个药 头孢他啶?22mm 物,加棒酸后,抑菌环直 氨曲南?27mm 径与不加棒酸的抑菌 头孢噻肟?27mm 环相比，增大值?5mm 头孢曲松?25mm 时,判定为ESBL产生 意味着可疑有ESBL ? * ESBLs初筛和确证试验 双纸片协同试验初筛ESBLs 表型确证试验检测ESBLs ESBLs初筛试验 * 超广谱β-内酰胺酶（ESBLs） 稀释法表型初筛结果:出现以下一种情况即可怀疑该菌株产生ESBLs： 头孢他啶或头孢噻肟或头孢曲松或氨曲南MIC≥2mg /mL 或头孢泊肟MIC≥8mg /mL * 超广谱β-内酰胺酶（ESBLs） 稀释法（表型确认试验） 头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸。 任何一组酶抑制剂复方制剂的MIC值比相应单药的MIC降低3个稀释度者即可判定该菌为产ESBL菌株。 * 检测ESBLs 志贺菌属 Shigella 志贺菌属 shigella 是人类细菌性痢疾的病原菌， 主要的肠道致病菌之一。 痢疾志贺菌 分类 四个血清群： A群：痢疾志贺菌（S. dysenteriae) B群：福氏志贺菌（S. flexneri) C群：鲍特志贺菌（S. boydii)