核酶微生物学.pdf

核酶 发现 与 应用 温故知新：什么 是 酶？ 20世纪30年代以前 酶 （enzyme）是一类由活细胞产生的 ，对其特异底 物具有高效催化作用的蛋白质 ，不改变反应的平衡 ， 只是通过降低活化能来加快反应的速度 所有的酶都是蛋白质？—— 核酶的发现对传统酶的定义提出了挑战， 1989年 ，发现核酶的两位科学家获得了诺贝尔化学奖 切赫 阿尔特曼 （Thomas Robert Cech） （Sidney Altman ） 1981年，Cech发现四膜虫rRNA的前体在没有蛋白质的情况下能专 一地催化寡聚核苷酸底物的切割与连接，具有分子内催化的活性 1983年，Altman等发现大肠杆菌RNaseP的蛋白质部分除去后 ，在体 外高浓度Mg2+存在下，与留下的RNA部分具有与全酶相同的催化活性 1986年，Cech又证实rRNA前体的内含子能催化分子间反应 核酶 （ribozyme）: 泛指一类具有催化功能的RNA分子 ，使磷酸酯水解或磷酸 基酯化来切割或间接切割RNA主链 锤头核酶 发夹核酶 剪切型核酶 丁型肝炎病毒核酶 根据催化反应 RNaseP I 内含子 剪接型核酶 II 内含子 RNA三级结构形成困难，因此核酶的发现具有里程碑式的意义 第一类内含子 group Ⅰ intron RNA分子结合游离的鸟苷或鸟苷酸，并将其3’羟 基呈递给5’剪接位点，转酯反应连接 第二步与之前一样 这里释放的内含子是线形的，而非套索状 Ⅰ类内含子比Ⅱ类小 转化为真正的核酶 内含子3’正好是鸟苷酸，可以进入鸟苷结 合口袋，同时内含子5’端也可以结合内在 指导序列。第三次转酯反应，使内含子环化 如果提供了游离的鸟苷或鸟苷酸，又有合适 的底物正好包含与内在指导序列互补的序列， 则可以持续切割——转化为真正的核酶 有缘学习更多+谓ygd3076或关注桃报：奉献教育（店铺） 第二类内含子 group Ⅱ intron 自剪接：前体RNA中内含子自身折叠成一种 特殊的构象，然后催化自身释放的化学过程 分支点高度活泼的腺苷酸（A）攻击5’剪接 位点的磷酸二酯键，形成套索结构 第二步转酯反应中，新游离的外显子3’羟基 攻击3’剪接位点，释放套索状的内含子，并 将5’和3’外显子连接起来。 剪切型核酶 ◆ 锤头结构 ◆ 发夹结构 ◆ 斧头结构 ◆ 结样结构 核酶的发现突破了酶的传统概念 现代的酶定义：酶由生物体内活细胞产生的、具有催化功能 的生物大分子 ，包括蛋白质和核酸 核酶的应用 抗肿瘤治疗 针对某些肿瘤基因设计特异性核酶，并将其导入细胞以阻断或降低 基因在细胞内的表达，最终可达到抑制病原增殖、肿瘤扩散目的 RNA治疗——RNA的修复 利用核酶的剪接能力，可引入新的基因功能或修复已有的基因缺陷 促进代谢平衡 利用特异性核酶对功能基因进行正向或负向调控，使代谢平衡，促进健康 有缘学习更多+谓ygd3076或关注桃报：奉献教育（店铺） 谢 谢 聆 听