农业部1163号公告-1-2009-动物性食品中己烯雌酚残留检测酶联免疫吸附测定法.pdfVIP

ICS 67．120 B45 中华 人民共和 国国家标准 农业部1163号公告一1—2009 动物性食品中己烯雌酚残留检测 酶联免疫吸附测定法 Determinationof residueinanimalderivedfood diethylstflbestrol linkedimmunosorbentmethod Enzyme assay 2009-02—06发布 中华人民共和国农业部发布 农业部1163号公告一1--2009 刖 蟊 本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。 本标准起草单位：中国农业大学动物医学院、山东省兽药监察所。 本标准主要起草人：沈建忠、高迎春、陈玲、冯修光、万宇平、张素霞、何方洋、魏秀丽、冯才伟。 本标准系首次发布的国家标准。 农业部1163号公告一1—2009 动物性食品中己烯雌酚残留检测 酶联免疫吸附测定法 1范围 本标准规定了动物性食品中己烯雌酚残留量的制样和快速检测一酶联免疫吸附测定方法。 本标准适用于猪肉、猪肝、虾样本中己烯雌酚残留量的快速筛选检测。可疑样品应用仪器方法进行 确认。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 6682分析实验室用水规则和实验方法 GB／T 3制样 3．1样品的制备 取新鲜或解冻的空白或供试动物组织，剪碎，置于组织匀浆机中高速匀浆。 3．2样品的保存 --20℃以下冰箱中贮存备用。 4测定方法 41方法提要和原理 采用间接竞争ELISA方法，在微孔条上包被偶联抗原，试样中残留的己烯雌酚与酶标板上的偶联 抗原竞争己烯雌酚抗体，加入酶标记的羊抗鼠抗体后，显色剂显色，终止液终止反应。用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度，吸光度值与己烯雌酚残留量成负相关，与标准曲线比较即可得出已烯雌酚残留 含量。 4．2试剂和材料 6682规定的二级水。 以下所有试剂，均为分析纯试剂；水为符合GB／T 4．21乙腈。 4．22丙酮。 4．23 j氯甲烷。 4．2．4氢氧化钠。 4．25磷酸(85％)。 4．26己烯雌酚检测试剂盒：2℃～8℃保存。 4261 96孔板(12条×8孔)：包被有己烯雌酚偶联抗原。 42．62己烯雌酚系列标准溶液：0pg／Lo．1pg／Lo．3pg／Lo．9pg／I2．7pg／L8．1肛g／L。 4263己烯雌酚抗体工作液。 4．264酶标记物T作液。 1 农业部1163号公告一1—2009 4265 2倍浓缩缓冲液。 4266 20倍浓缩洗涤液。 4．2．6．7底物液A液。 4268底物液B液。 4269终止液。 427乙腈丙酮溶液(84+16，v／v)：取乙腈84mL和丙酮16mL，混匀。 4．2．82mol／L氢氧化钠溶液：称取8．09氢氧化钠，用100mI，水溶解，冷却至室温。 4．2．96tool／I．磷酸溶液：100mL磷酸加去离子水150mL，混合均匀。 4 水)用于溶解干燥的残留物。2℃～8℃保存，有效期1个月。 4．2 份水)用于酶标板的洗涤。2℃～8℃保存，有效期1个月。 4．3仪器与设备 4．3．1酶标仪：配备450nm滤光片。 432匀浆器。