不同脑区内mGluR1和mGluR5甲基化对产前应激子代大鼠抑郁样行为的影响及其机制.pdfVIP

摘要 不同脑区内mGluR1 和mGluR5 甲基化对产前应激子代大鼠抑郁样 行为的影响及其机制 摘要 研究背景：越来越多的流行病学调查和动物模型研究表明，产前应激（PS ）可 能导致抑郁症样行为的后代，并且具有性别特异性。然而，其基本机制尚未阐明。 本研究旨在探讨mGluR1 和mGluR5 基因启动子区甲基化对PS 诱导的子鼠抑郁样 行为的影响。 研究目的：本研究采用束缚应激模型，同时给予 5-azaD (5-氮-2 ′脱氧胞苷， 5-aza-2 ′-deoxy-cytidine,5-azaD，即地西他滨，DNA 甲基化转移酶抑制剂) ，检测一 月龄子代大鼠海马体和前额叶皮层mGluRs （mGluR1 和mGluR5 ）及启动子区DNA 甲基化的变化，和雌雄子代大鼠之间差异来探讨表观遗传在产前应激对子代抑郁行 为影响中的作用机制，为以后的理论研究提供实验依据和理论基础。 研究方法：本实验采用成年 Sprague-Dawley 大鼠（雌性 180-230g ，雄性 230-280g ），按雌雄3:1 于每晚20:00 合笼，第二日早上8:00 对交配雌鼠进行阴道涂 片检测，在阴道检测到精子反应后将其放入单笼喂养。将怀孕的母代随机分成两组： 对照组与产前应激组，在孕晚期即临产前七天举行束缚应激。子鼠产出后第 21 天 母子分离并且依性别分笼。子鼠分组如下；对照组（Control, CON ）、产前应激组 （Prenatal stress ，PS ）、产前应激+ 5-azaD 组（PS-5-azaD ）产前应激+生理盐水组 （PS-Saline），行为学前三天，每天3D 立体脑定位对PS 子鼠注射等量的5-azaD 或 Saline。子代大鼠生长到第30 天进行行为学测验，采用糖水偏好和强迫游泳检测抑 郁样行为，旷场实验检测子代焦虑样行为。运用实时定量 PCR 方法检测子代大鼠 海马体和前额叶皮质mGluR1 和mGluR5 的mRNA 的表达；采取western-blotting 的方式检测子代大鼠海马体和前额叶皮质 mGluR1 和 mGluR5 的蛋白表达；采用 BSP 方法检测子代大鼠海马体和前额叶皮质mGluR1 和mGluR5 的 DNA 甲基化程 度。 研究结果：（1）产前应激子代大鼠的抑郁样行为水平较对照组显著升高，而给 予5-azaD 的产前应激的子代大鼠抑郁样行为水平较应激组显著降低，雌雄子代无明显 I 摘要 差异。（2 ）产前应激子代大鼠的海马和前额叶皮层的mGluR1 和mGluR5 的mRNA 和 蛋白表达显著高于对照组，雌雄子代之间有性别差异(p0.05) 。（3 ）产前应激子代大 鼠的海马和前额叶皮层的DNA 启动子区甲基化表达显著高于对照组，雌雄子代之间 有性别差异(p0.05) 。 结论：本课题研究结果发现PS 可诱发子代大鼠抑郁和焦虑样行为,可能是由于 mGluR1 和mGluR5 启动子区甲基化修饰升高而引起的。而5-azaD 的抗抑郁效应伴 随着mGluR1 和mGluR5 的mRNA 表达和蛋白表达的减少和启动子区DNA 甲基化 的降低，进一步说明了DNA 甲基化修饰可能是参与抑郁症发病的重要表观遗传学 组成部分。 关键词：产前应激；甲基化；抑郁；海马；mGluR 1；mGluR5 论文类型：理论研究 II 插图索引 插图索引 图1 实验流程图 23 图2 产前应激子代大鼠糖水偏好度 25 图3 产前应激子代大鼠不动时间 25 图4 产前应激子代大鼠跨出第一格潜伏期 26 图5 产前应