特殊染色二选编.ppt

一、横纹肌染色 Mallory 氏磷钨酸苏木素染法 ( 简称 P 、 T 、 A) 配制方法： ? Mallory 氏磷钨酸苏木素 磷钨酸 2g 苏木素 0.1g 蒸馏水 100ml ? 先以 50ml 蒸馏水加热溶解苏木素，再以 50ml 蒸馏水溶 解磷钨酸，待苏木素水溶液冷却后混合即可，于 6-12 个 月后任其自然成熟，能得最佳的结果。如急用时，可加 过氧化氢液 0.2ml ，以促其成熟。 操作方法： ? （ 1 ）固定于 Zenker 氏固定液的组织，如系 10% 甲醛固定的组织切 片，可再经 Zenker 氏液处理，如不处理亦可染色，但其结果欠佳 ? （ 2 ）石蜡切片 如系 Zenker 氏液固定的组织，或曾经 Zenker 氏液 处理过的切片，在染色之前需经 0.5% 碘酒精脱汞，水洗后再经 0.5% 硫代硫酸钠的脱碘。 ? （ 3 ）经蒸馏水洗后，将切片置于 0.25% 高锰酸钾溶液中 5 分钟。 ? （ 4 ）经蒸馏水洗后，再将切片置于 5% 草酸溶液中漂白 2 分钟。 ? （ 5 ）经蒸馏水充分洗涤后，投入 Mallory 氏磷钨酸苏木素染液中 2-4 小时，甚至延长到 18 小时以上。 ? （ 6 ）直接以 95% 酒精分化。 ? （ 7 ）纯酒精脱水。 ? （ 8 ）二甲苯透明，树胶封固。 【结果】 神经胶质和肌纤维均染蓝色，纤维蛋白亦染蓝色， 而细胞间结缔组织纤维则染浅红色或不染色；胶原多 呈粉红色，粗弹力纤维有时呈紫蓝色。 【应用】 ? 诊断横纹肌肿瘤 ? 显示神经胶质 第七节 病原微生物染色法 一、细菌染色 细菌在 HE 染色上不能分类，故须作细菌染色。 ? 应用： ? （ 1 ）一些疑为细菌感染性炎症，可用细菌染色进一步 确定病原诊断。如伤寒肉芽肿性炎或葡萄球菌性炎等 化脓性炎症的诊断中细菌染色有很重要的诊断价值。 ? （ 2 ）麻风病与结核病：均由菌体表面含蜡质膜的抗酸 杆菌所感染形成，故须经抗酸染色才能着色，从而与 其它疾病相鉴别。 1.Wathin-starrg 胃幽门螺杆菌染色 染色原理： ? 胃幽门螺杆菌含有蛋白和多糖类物质，在一定 温度下能吸附硝酸银溶液中的银离子，再经还 原反应，形成金属银。 试剂配制 1. 醋酸缓冲液 ? 0.2mol/L 醋酸缓冲液 10ml ? 蒸馏水 240ml 2. 1% 硝酸银 ? 硝酸银 1g ? 醋酸缓冲液 100ml 3. 2% 硝酸银 ? 硝酸银 0.2g ? 醋酸缓冲液 10ml 4. 5% 明胶液 ? 明胶 5g ? 醋酸缓冲液 100ml 5. 3% 对苯二酚液 ? 对苯二酚 0.3g ? 醋酸缓冲液 10ml 6. 明胶对苯二酚液 ? 3% 对苯二酚液 1ml ? 5% 明胶液 15ml 7. 显影液 ? 明胶对苯二酚液 16ml ? 2% 硝酸银液 3ml 染色步骤： ? 1. 脱蜡至水 ? 2. 醋酸缓冲液洗 2 次 ? 3. 切片置于 1% 硝酸银液内， 56 度水浴箱作用 1h ? 4. 取出切片，立即侵入显影液内 2-3min ，至切片呈金 黄色为止。 ? 5. 将切片侵入 56 度蒸馏水中洗 1-2min ? 6. 蒸馏水洗 1 次 ? 7. 无水乙醇脱水 ? 8. 二甲苯透明 ? 9. 中性树胶封固 染色结果： ? 幽门螺杆菌呈黑色，背景呈黄色 2. 齐 - 尼氏抗酸杆菌染色法