猕猴桃属植物自然居群的遗传结构与种间基因渐渗研究.docxVIP

猕猴桃属植物自然居群的遗传结构与种间基因渐渗研究 猕猴桃隶属于猕猴桃科 (Actinidiaceae) 猕猴桃属 (Actinidia Lindl.) ，为 多年生木质藤本植物，雌雄异株，是一种重要的果树资源。 在我国野生资源丰富， 是半特有属。 随着生态环境的破坏和猕猴桃产业化的发展， 为了解决全世界猕猴桃产业支 柱建立在单一的雌性品种上的遗传风险， 需了解其自然资源现状， 提出有效的保 护和利用措施， 通过育种手段， 获得高产、 优质的品种是实现猕猴桃产业健康发 展的必经之路。 另一方面， 猕猴桃种间杂交和种内多倍化现象的普遍存在， 使物 种间界限不明显， 了解种间的遗传结构和基因渐渗现象， 可以为猕猴桃属植物的 系统进化和分类关系提供重要的理论依据。 本文结合以上几个方面，以中华猕猴桃 (Actinidia chinensis) 和美味猕猴 (A．deliciosa) 为主，同时涉及阔叶猕猴桃 (A．latifolia)、毛花猕猴桃 (A ．eriantha) 、绵毛猕猴桃 (A．fulvicoma var ．lanata) 、金花猕猴桃 (A ．chrysantha) 和京梨猕猴桃 (A． callosa var ．henryi) 等 7 个分类群，利用 SSR标记从 DNA水平上对 10 个同域分布的不同物种自然居群进行了遗传多样性、 居群遗传结构的分析以及种间杂交渐渗的探讨。 主要结果如下： (1) 利用 9 对 SSR 引物，在猕猴桃属 7 个物种共 747 个样本上共检测到 253 个等位基因，平均每位 点等位基因数为 28.11 个，扩增等位基因数最多的位点为 UDK96-009(48 个) 。 在同域分布物种间的共有等位基因上， 中华猕猴桃和美味猕猴桃的共有等位 基因的比率最高，达 60％以上；而湖北莽山 (HM)毛花猕猴桃和金花猕猴桃物种 间共有等位基因比率最低为 18.5 ％。共享等位基因表型频率在物种间存在着差 异，而且与各同域分布物种样本的交错程度或间距存在关联。 居群内遗传多样性分析表明： 各物种居群内等位基因平均数 A 为 4.45 ～ 14.44 ；多态位点百分率 P=100，PIC 值为 0.644 ～ 0.870 ，表明猕猴桃属植物自 然居群具有极高的遗传多样性。各物种居群间的分化系数依次为：美味猕猴桃 (0.080) ＜中华猕猴桃 (0.086) ＜毛花猕猴桃 (0.116) ＜金花猕猴桃 (0.118) ＜阔 叶猕猴桃 (0.119) 。 两两物种间的遗传分化系数平均范围在 0.008 ～0.108 ，同域分布物种间的 遗传分化低于物种内异域居群间的遗传分化， 其中同域分布的中华猕猴桃和美味 猕猴桃两物种间的基因流均为最高， 其余物种间的基因流也都大于 1。利用 AMOVA 分析结果同样表明：大部分遗传变异来源于居群内 (79.45 ％) ，居群间遗传分化 系数为 0.1698 。 居群 UPGMA聚类揭示中华猕猴桃和美味猕猴桃以地理区域优先聚类，其它物种多以物种分类群优先聚类， 个体聚类结果显示多数个体聚在各自居群组内，但各地理居群并不按地理距离的远近聚类，这与 Mantel 相关性检测所揭示的居群间遗传距离与地理距离没有显著性相关的结果一致。 中华／美味猕猴桃复合体近缘种间存在明显的共祖多态性和杂交渐渗现象， 近缘种植株分布的交错程度或是否存在亚居群结构是影响杂交渐渗的因素之一。 阔叶猕猴桃和毛花猕猴桃也存在着非对称性基因渐渗， 表明亲缘关系较远的物种间杂交渐渗事件稀少，但存在个别同塑事件。 (4) 采用空间自相关分析方法 对河南西峡和陕西商南同域分布的中华猕猴桃和美味猕猴桃自然居群 SSR遗传变异的空间结构进行了分析， 选用的 9 对 SSR引物分别从两居群中共扩增出 104 个等位基因，选择其表型频率在 20％～ 80％的 SSR等位基因，运用等样本频率 方法分别对中华猕猴桃和美味猕猴桃及其中华／美味猕猴桃复合体居群进行了 空间自相关系数 Moran’s I 值计算。 结果表明：中华猕猴桃和美味猕猴桃的遗传变异在两居群内均存在着一定程 度的空间结构，尽管近半数或半数以上的等位基因在居群内表现为随机分布的空 间模式，但也有相当比例的等位基因在居群内 (29.6 ％～ 48.0 ％) 和复合体居群内 (51.0 ％，44.7 ％) 呈现渐变、衰退、双向衰退或侵扰模式。而且其居群内遗传变 异的空间分布规律都基本一致：相距在 100 m 以内，特别是 30 m 范围内的个体 间的等位基因表现出显著性的正相关，随着地理距离的增大逐渐显示出负相关。 本文通过 SSR分子标记，运用不同的统计软件对结果进行分析， 从不同的方 面揭示了猕猴桃属植物中存在较高的遗传多样性