第十一章DNA的复制和修复.pptVIP

第十一章 DNA的复制和修复;一、DNA的复制方式;(深蓝: 15N);二、 DNA复制的酶学;（一）DNA聚合酶的活性; 5′至3′的聚合活性（ 5′→ 3′ ） ;DNA-pol I 5′? 3′外切酶活性的功能：; 原核生物中的三种DNA聚合酶?;（二）DNA拓扑异构酶(解旋酶） 既能水解，又能打断碱基互补配对的氢键 拓扑酶Ⅰ 切断DNA双链中的一股 拓扑酶Ⅱ 切断DNA双链 （三）单链DNA结合蛋白（SSB） 维持模板处于单链状态 保护单链的完整 （四）引物酶 是RNA聚合酶，合成一段RNA引物;（五） DNA连接酶（ligase）; ;三、DNA的复制过程; 1. DNA复制的起点 原核生物从一个固定的起始点开始，同时向两个方向进行的，称为双向复制; 2.复制叉的形成 复制叉----复制开始后由于DNA双链解开，在两股单链上进行复制，形成在显微镜下可看到的叉状结构。;3.起始的过程;DNA复制起始的过程;拓扑异构酶;拓扑异构酶;拓扑异构酶;拓扑异构酶;(二)DNA复制的延伸;;;;;;;;;;冈崎用电子显微镜看到了DNA复制过程中出现一些不连续片段，这些不连续片段只存在与DNA复制叉上其中的一股。后来就把这些不连续的片段称为冈崎片段。;3.半不连续复制;(三) 复制的终止;;RNA模板;五、 DNA的损伤修复;2. 引发突变的因素 ;3. 突变分子改变的类型 错配 （点突变） 一个碱基改变 缺失、插入和框移突变 片段插入或缺失 重排 较大片段重组或重排 ;镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基;缺失或插入都可导致框移突变。;5′…. UCACGACAUAUG….3′;重排(rearrangement)与重组(recombination);4. 损伤的修复;（一）光修复 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢 复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。;切除修复机制的基本过程是将受损的DNA片段切除，然后再以对侧链为模板，重新合成新链进行修复。;UvrC切除;这是DNA的复制过程中所采用的一种有差错的修复方式。 修复时，利用重组蛋白RecA的核酸酶活性，将另一股健康亲链与损伤缺口相互交换。;RecA重组蛋白修复DNA示意图;SOS修复：造成DNA损伤或抑制复制的处理均能引起一系列复杂的诱导效应，称为应急反应（SOS response）。此过程诱导产生切除修复和重组修复中的关键蛋白和酶，同时产生无校对功能的DNA聚合酶。;第十二章 RNA的生物合成 (转录);第一节 RNA转录合成的特点;能够转录RNA的那条DNA链称为模板链(template strand) ，也称作有意义链或Watson链或负链。 而与之互补的另一条DNA链称为编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链或正链。 ;;5′···GCAGTACATGTC ···3′;RNA转录合成时，以DNA作为模板，在RNA聚合酶的催化下，连续合成一段RNA链，各条RNA链之间无需再进行连接。;特定起始点和特定终止点之间的DNA链构成一个转录单位，通常由转录区和有关的调节顺序构成。 ;第二节 RNA转录合成的过程;（一）转录起始;原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。;?因子识别转录起始点，并促使核心酶结合形成全酶复合物。 转录开始时能与RNA全酶结合的DNA顺序（双链）称为启动子（promoter) 启动子序列通常由一些带共性的保守序列构成。;;被RNA聚合酶辨认的区段就是位于转录起始点-35区的TTGACA序列。 酶与该区结合后，即滑动至-10区的TATAAT序列，并启动转录。 ;RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;⑵ DNA局部双链解开。;1. ?亚基脱落，RNA聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。;RNA转录的延长;转录空泡(transcription bubble)的形成;转录至模板某一位置 停止形成磷酸二酯键  RNA—DNA杂交链解开 DNA解链的部分重新形成双螺旋 RNA聚合酶离开DNA; 不依赖ρ-因子的终止 DNA模板上有终止信号 转录出来的RNA RNA聚合酶遇此结构即停止工作。 DNA和RNA（dA：rU） 稳定性下降;; 依赖ρ-因子的终止 ρ-因子的结构及特点 ; ρ-因子的作用 ;新生RNA;（一）转录起始