《生物化学》第2章氨基酸多肽和蛋白质.pptx

;氨基酸 —— 组成蛋白质的构件分子 存在自然界中的氨基酸有180余种， 但组成人体蛋白质的氨基酸仅有20种， 且均属 l-氨基酸（甘氨酸除外）。;甘氨酸;氨基酸具有的共同的结构特征;;手性和旋光性;构型;构型与旋光方向的区别;按照Ｒ基团来分类氨基酸;;;;;;氨基酸的理化性质;等电点(isoelectric point, pI);等电点的计算（以甘氨酸为例）;;氨基酸的化学反应;（一）ɑ-氨基参加的反应;2.与甲醛的反应;;3.与酰化试剂的反应;氨基酸与5一二甲氨基萘-1-磺酰氯（dansyl chloride, DNS）的反应;4. 烃基化反应;苯异硫氰酸酯（PITC）;5. 西佛碱反应;6. 脱氨基反应：氨基酸在体内经氧化酶脱去氨 基变成酮酸;㈡α-羧基参加的反应;2. 成酰氯反应;3. 叠氮反应;4. 脱羧基作用;㈢α-氨基和α-羧基共同参加的反应;2. 成肽反应 一个氨基酸的氨基 与另一个氨基酸的 羧基缩合失水形成 肽键。;;㈣ 侧链基团参加的反应;;芳香族氨基酸的紫外吸收;多肽和蛋白质;肽和肽键结构;肽的命名方式;天然存在的活性肽;谷胱甘肽(glutathione, GSH);蛋白质通论;蛋白质的化学组成与分类;蛋白质的化学组成与分类;⑴ 单纯蛋白质 清蛋白(albumin)：溶于水、稀酸、稀碱、稀盐，为饱和硫 酸铵沉淀, 血清清蛋白、乳清蛋白 球蛋白(globulin)：溶于水和不溶于水两类，为半饱和硫酸 氨所沉淀，血清球蛋白、肌球蛋白、植物种子球蛋白 谷蛋白(glutelin)：不溶于水、醇及中性盐，但易溶于稀酸 和稀碱，米谷蛋白、麦谷蛋白;谷醇溶蛋白（ prolamine): 不溶于水和无水乙醇，溶于 70%-80%乙醇, 脯氨酸和酰氨较多，非极性侧链远多于极 性侧链，玉米醇溶蛋白、麦醇溶蛋白 组蛋白(histone)：溶于水及稀酸，可被氨水沉淀,分子中 组氨酸、赖氨酸较多，分子呈碱性，小牛胸腺组蛋白 鱼精蛋白(protamine)：溶于水和稀酸，不溶于氨水, 碱性 氨基酸较多，分子呈碱性，鲑精蛋白 硬蛋白(scleroprotein)：不溶于水，稀酸和稀碱，作为结 缔及保护功能的蛋白质，角蛋白、胶原、弹性蛋白;⑵ 结合蛋白质;蛋白质的分子大小;蛋白质的生物学功能;调节新陈代谢-调节蛋白，如糖代谢相关的胰岛素， 参与调节多种蛋白激酶活性的钙调素。;;营养素的储存-营养和存储蛋白;运动功能-肌肉中的肌球蛋白和肌动蛋白是运动系统的必 要成分，他们构象的改变引起肌肉的收缩，带动机体运动。 细菌中的鞭毛蛋白有类似的作用，它的收缩引起鞭毛的摆 动。从而使细菌在水中游动。;细胞的结构组分-结构蛋白，如胶原蛋白是主要的细胞外 结构蛋白，参与结缔组织和骨骼作为身体的支架；动物的 毛发和指甲都是由角蛋白构成的。;防御功能-防御蛋白，高等动物的免疫反应是机体 的一种防御功能，主要是通过蛋白质（抗体）来 实现的。;信息的识别与传导功能-受体蛋白，动物、植物、微生物对;遗传调控功能-遗传信息的储存和表达都与蛋白质有关， DNA在储存时是缠绕在蛋白质（组蛋白）上的，有些蛋白 质，如阻遏蛋白，与特定基因的表达有关。;蛋白质构象和蛋白质结构的组织层次;2.蛋白质分子结构的四个层次;蛋白质的三维结构测定;;蛋白质的一级结构测定的准备工作;蛋白质一级结构的测定;1.多肽链的拆分 由多条多肽链组成的蛋白质分子，必须先进行拆分，几条多肽链借助 非共价键连接在一起，常为寡聚蛋白质，如，血红蛋白为四聚体，烯 醇化酶为二聚体；可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理，即可分开多 肽链(亚基).;几条多肽链通过二硫键交联在一起。可在8 mol/L尿素或6mol/L盐酸胍 存在下，应用过甲酸氧化法或巯基还原法拆分多肽链间的二硫键，然 后用烷基化试剂保护生成的巯基，以防止它重新被氧化;;2.分析多肽链的N-末端和C-末端;2.分析多肽链的N-末端和C-末端;;;;;;;;;;5.多肽链的切割-蛋白酶和化学试剂;;;;;;;;;;;设一个十肽，水解法A得到四个肽段，分别为A1：Ala-Phe； A2：Gly-Lys-Asn-Tyr； A3：Arg-Tyr；A4：His-Val； 水解法B得到三个肽段，分别为 B1：Ala-Phe-Gly-Lys；B2：Asn-Tyr-Arg；B3：Tyr-His-Val。 A1 Ala-Phe B1 Ala-Phe-Gly-Lys;8.确定原多肽链中二硫键的位置-对角线电泳;在酸性pH=6.5的条件下进行第一向 电泳，酶解产物肽段将按其大小及 电荷的不同而分离。将滤纸旋转90 度，在与第一向完全相同的条件下 进行第二向电泳，无二硫键的肽不 受酸的作用而在两向电泳中迁移率 相等，将位于一条对角线上。;其他的蛋白质序列的测定方