食品快速检测技术（新）7.牛乳中金黄的葡萄球菌快速检测牛奶中金黄色葡萄球菌快速检验.docVIP

电子教材 《食品快速检测技术》电子教材 金黄色葡萄球菌快速测定（显色培养基法） 金黄色葡萄球菌是常见的食物中毒病原菌之一，为有效控制病原菌的发生和扩散，准确及时的检测手段是预防和控制金黄色葡萄球菌传播的关键。目前金黄色葡萄球菌传统的检验方法（国标法）需要分离培养、镜检观察、生化鉴定等多个步骤，检测周期长，整个过程大约需要4-7天，且操作复杂。而金黄色葡萄球菌显色培养基仅需通过单一菌落的典型色彩即可进行初步鉴定，大大提高了对金葡的检出率。以奶粉为例，使用金黄色葡萄球菌显色培养基快速检测金黄色葡萄球菌。 一、检测原理 金黄色葡萄球菌显色培养基，其中蛋白胨、大豆胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；显色剂与金黄色葡萄球菌具有的酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在无色透明平板上，金黄色葡萄球菌产生紫红色、红色或粉红色菌落（图1），滴加盐酸后菌落周围产生透明圈。 图1 图1 金黄色葡萄球菌的菌落 二、检测过程 在检验之前，我们先按照说明书制备金黄色葡萄球菌显色培养基。第一步，制作培养基。称取8.45g显色培养基干粉于盛有100毫升蒸馏水的锥形瓶中加热煮沸灭菌，然后将该锥形瓶放在水浴锅中冷却至50℃。第二步制作平板。将冷却至50℃的显色培养基倒入几个灭菌培养皿中，冷却凝固后备用。 接下来我们对奶粉进行处理，其处理方法按照国标规定的方法进行（图2）。 图2 金黄色葡萄球菌检验国标及样品处理方法 图2 金黄色葡萄球菌检验国标及样品处理方法 1.样品处理：首先在无菌室中称取25g奶粉，置于盛有225毫升7.5%氯化钠肉汤的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打一到两分钟。 2.增菌：将上述样品匀液于36℃培养18至24小时。 3.接种：将增菌液划线接种于金葡显色培养基平板中。 4.培养：36℃培养18至24小时。 三、结果判定 金黄色葡萄球菌的菌落外观为紫红色、红色或粉红色；滴加1mol/L盐酸后菌落周围产生透明圈。其他菌的菌落外观为蓝色、无色、淡黄色菌落或抑制不生长。