临床生物化学：第二十二章 妊娠期疾病的生物化学诊断.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 基因分析直接采用未经培养的羊水细胞或绒毛细胞作为分析标本，通过分子生物学的方法，在DNA或RNA的水平分析特定基因。 包括斑点杂交、Southern印记杂交、各种特异基因的克隆、RFLPS片段的获得以及聚合酶链反应（PCR）技术、寡核苷酸探针技术、PCR-SSCP技术、基因序列测定技术等。 （七）基因分析 返回章目录 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 此外，对高危人群应作肝炎病毒、HIV及禁忌药物的筛查。必要时还应进行地中海贫血和镰状红细胞贫血的基因检查。 推荐补充叶酸以减少胎儿神经管病变的风险。 妊娠24～28周时，应进行葡萄糖耐量试验。有时还应该在24～30周时筛查病人早产的风险。 一、母体的评价 * 二、胎儿的评价 胎儿成熟度的检测项目很多，其中以胎儿肺成熟度最能反映胎儿出生后的生存能力，所以临床上常常通过检测胎儿肺成熟度来了解胎儿成熟情况。胎儿先天性缺陷常用筛查指标：母体血清AFP、hCG、游离E3检测及羊水中AFP测定，卵磷脂／鞘磷脂比值测定，睾酮测定等。 * （一）胎儿肺成熟度评价试验 1.卵磷脂／鞘磷脂比值（L／S） 2.羊水双饱和磷脂酰胆碱（DSPC）测定 3.磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol，PG)测定 4.泡沫稳定性实验（foam stability index，FSI） 5.荧光偏振(fluorescence polarization assay，FPA) 6.薄层小体计数（lamellar bodies counts） * 标本的收集和处理： 超声导引经腹壁或阴道穹隆膜穿刺羊膜腔 采集羊水 离心除去残渣 立即测定 4℃冷藏 * 1.羊水卵磷脂/鞘磷脂比率和双饱和磷脂酰胆碱 　　 肺表面活性物质的最主要活性成分是DSPC，约占卵磷脂的85%。在羊水中的浓度随着妊娠期的延长而增加。 鞘磷脂是肺表面活性物质的次要成分，几乎所有鞘磷脂都来自于不成熟的肺。 L/S常随妊娠期延长而增加，与胎儿肺成熟度密切相关。 * L/S2.0、DSPC5mg/L提示肺成熟。 母亲有糖尿病，L/S3、DSPC10 mg/L, 才提示肺成熟。 在多胎妊娠，对每个胎儿羊膜腔均应取样。 结果解释 * 肺成熟度组合试验同时测定L/S比率、饱和卵磷脂在总卵磷脂中的比率以及磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇在总磷脂的比率。 通过冷丙酮沉淀法将高度饱和的卵磷脂与低饱和卵磷脂分离，以便确定饱和的卵磷脂在总卵磷脂中的比率。 2.肺成熟度组合试验 * 结果解释 L/S2.0、PG在丙酮沉淀部分中所占比率3%提示肺成熟 。 将酸性PG和PI从卵磷脂中分离出来，其提供的L/S比率更加准确。 PG＞2.0μmol/L时，提示胎儿成熟 。 * 羊水中肺表面活性物质达到足够浓度时，能够形成一个高度稳定的膜，从而支撑泡沫的架构。但乙醇能将该类物质从膜中除去。 　　在固定体积的未稀释羊水中，逐渐增加乙醇量并混合，在羊水能支持泡沫稳定的情况下，记录所需乙醇的最大体积。 3. 泡沫稳定性指数 * FSI＞0.47为肺成熟。 实验必须在20℃ ～25℃下进行，温度过高或过低都会影响泡沫的稳定性。 结果解释 * 用已二烯（DPH）作为荧光染料，结果以荧光偏振值报告 用NBD-PC或PC-16 ，结果以磷脂/清蛋白（mg/g）报告 FPA是目前最普遍使用的定量方法，比测定L/S比率更加准确 4.荧光偏振(FPA ) * 结果解释 荧光偏振值＜260mP提示肺明显成熟，＞290mP提示肺不成熟。 羊水中血液污染0.5%，会降低P值结果。以230mP为明显成熟、＞290mP为不成熟 。 磷脂/清蛋白（mg/g）临界值是70mg/g清蛋白 。 * 5.薄层小体计数 使用标准血细胞计数仪的血小板通道，可以对羊水中薄层小体微粒直接进行计数测定。这些表面活性物质颗粒从2~20fl不等，用全血细胞的血小板计数和血小板大小测定的方法可对这些颗粒进行定量。该法性价比好，结果可靠，许多研究者主张用该法快速测量胎儿肺成熟度。 * 　结果解释 参考范围为：薄层小体计数≥5.5×10