临床生物化学：第二十章 胃肠胰疾病的生物化学诊断.pptVIP

3.儿童乳糖不耐受症 首选乳糖耐量试验及乳糖酶加乳糖试验，这是诊断乳糖不耐受症最有效的试验。乳糖酶缺乏症等导致的消化因子不足。 【小 结】 本章简述了胃、胰、肠三个脏器的功能紊乱及其病理机制，以及部分重要胃肠激素与作用 重点介绍了胃酸、胃蛋白酶原、胃泌素、胰脂肪酶等的测定方法与评价 这些检测指标在消化性溃疡、胰腺炎、消化吸收不良等主要胃肠疾病中的临床应用 当前对于疾病的诊断尤其是早期诊断仍缺乏灵敏、特异、有效的检测指标 因此，在分子机制研究、基因检查和诊断性单克隆抗体制备等方面建立更理想的诊断方法已成为当前实验诊断技术的研究重点 【展 望】 谢谢大家！ 返回本章首页 * 样本与微粒以一定比例混合，形成抗原抗体复合物；该复合物与吖啶酯标记的连接物反应形成双抗体2抗原抗体复合物 吖啶酯在过氧化氢的稀碱溶液中发生氧化还原反应生成10-甲基吖啶酮；当10-甲基吖啶酮恢复到基态时发光，根据发生强度可算出PGⅠ/PGⅡ浓度 测定原理 胃蛋白酶原检测建议使用血清，PGⅠ/PGⅡ没有日内变化和季节变化，不受饮食的影响，个体有较稳定的值；PGⅠ/PGⅡ受质子泵抑制剂、H2受体抑制剂的影响，故检测PG时有必要确认有无服用上述药物 要求检测试剂盒稳定、精密度好，基本不受脂血、溶血、黄疸、维生素C及RF等物质的干扰：开盖放在试剂仓中30d，空白无变化，质控结果基本无变化，无需校准 方法学评价 （三）胃泌素测定 在众多的胃肠激素中，GAS是很重要的激素 对刺激胃酸和消化酶的分泌以及胃的蠕动具有不可或缺的作用 血浆中胃泌素分子结构有多种形式，其中由17个氨基酸残基所组成的小胃泌素（G-17）活性最强，约占总量2/3 G-17和蛋白质结合物免疫动物制备特异性抗体 血清中胃泌素含量测定，从方法学上大致有放射免疫法测定、酶联免疫法等，目前一般采用放射免疫法测定 方法概述 放免法测定胃泌素是：样品中的G-17和125I-G-17在适宜的缓冲液中共同竞争性的与抗体结合，反应平衡后加入抗免IgG免疫分离剂测其放射性，从标准剂量抑制曲线查出血清中的浓度 测定原理 多数检测药盒使用G-17定标，因为G-34难以获得纯品；溶血样本会影响实验结果；由于实验特异性 某些试剂（盒）可能与胆囊收缩素有交叉反应；胃泌素不很稳定，4℃48h活性失去50% 故不适合使用测活性的方法；抗酸剂、抗副交感神经药和H2受体拮抗剂药物在采集样本前24h停止使用 方法学评价 （四）淀粉酶测定 淀粉酶（amylase，AMY），主要存在于唾液腺和胰腺中，即唾液型AMY(S-AMY)和胰型AMY(P-AMY) 作为胰腺疾病尤其是急性胰腺炎诊断的试验，P-AMY检测是为最佳选择 AMY测定祥见第九章 （五）脂肪酶 脂肪酶（lipase，LPS）分子量约为38KD，是一群低度专一性酶 主要来源于胰腺，其次为胃，小肠 能水解多种含长链（8 ~18C链）脂肪酸的甘油酯 ①测定产物游离脂肪酸的增加，如滴定法、分光光度法、荧光法 和pH电极法等 ②测定底物的减少量，如比浊法、扩散法等 ③测定LPS的实际质量，如双抗体夹心免疫分析法、乳胶凝集法 目前一般使用自动生化分析仪采用酶偶联显色法进行测定 方法概述 测定原理 ①酶偶联显色法特异性高，通过双试剂也基本可解决内源性甘油的干扰问题 ②比浊法操作简易，但实验误差较大 ③ LPS与AMY比较，不受唾液腺和胰腺影响，特异性更高 ④ LPS测定有诸多方法，原理不同，参考区间和医学决定水平都有较大差异，应用时必须注意 方法学评价 （六）尿胰蛋白酶原Ⅱ 测定尿胰蛋白酶原Ⅱ多采用定性试验，常用免疫层析法；定量常用免疫荧光法 方法概述 测定原理 免疫层析法检测原理见有关章节 ①目前胰蛋白酶原Ⅱ检测多为定性试验，常用免疫（纸）层析法；方法简便、快速，能满足临床急诊需要 定量常用免疫荧光法 ②应用尿胰蛋白酶原Ⅱ诊断急性胰腺炎与血、尿AMY和血清LPS测定比较具有简便、快速的优点 方法学评价 二、常用功能试验 （一）胰外分泌功能试验 胰腺外分泌功能试验可分为直接法和间接法两类 直接试验是应用某些胃肠激素直接刺激胰腺分泌，通过十二指肠插管收集胰液进行分析，以了解胰腺外分泌功能 各种胰外分泌功能试验见表21-1 方法概述 直接试验 ：促胰液素试验、促胰液素-胆囊收缩素试验 间接试验：Lundh餐试验、BT-PABA试