一种新型冠状病毒核酸纯化试剂及纯化方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113145087 A (43)申请公布日 2021.07.23 (21)申请号 202110393200.8 (22)申请日 2021.04.13 (71)申请人 杭州安誉科技有限公司 地址 310000 浙江省杭州市江干区大农港 路1216号2号楼6层607室 (72)发明人 冯瑞娟　章贤骏　李海锋　陈倩倩　 (74)专利代理机构 北京国翰知识产权代理事务 所(普通合伙) 11696 代理人 叶帅东 (51)Int.Cl. B01J 20/28 (2006.01) B01J 20/24 (2006.01) B01J 20/30 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/6806 (2018.01) 权利要求书1页 说明书8页 附图3页 (54)发明名称 一种新型冠状病毒核酸纯化试剂及纯化方 法 (57)摘要 本发明公开了一种新型冠状病毒核酸纯化 试剂及纯化方法，属于核酸纯化技术领域，核酸 纯化试剂包括包覆有硒代赖氨酸改性壳聚糖的 纳米磁珠、结合液、洗涤I液、洗涤II液和洗脱液。 纯化方法包括，将待纯化样本、磁珠和结合液加 入离心管中，混匀，磁分离，弃上清；将离心管中 加入洗涤I液，清洗，磁分离，吸净管盖及管底的 残液；将离心管中加入洗涤II液，清洗，磁分离， 吸净管盖及管底的残液；将离心管中加入洗脱 液，60‑70℃下放置10‑15min，每隔1‑2min轻摇混 匀，磁分离，小心吸取上清液至新的离心管中，放 A 入‑20℃冰箱保存。本发明方法纯化过程快速、结 7 果准确、精密度高，能够提高核酸纯化的产量、纯 8 0 5 度、重复性和稳定性。 4 1 3 1 1 N C CN 113145087 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.硒代赖氨酸改性壳聚糖在包覆四氧化三铁纳米颗粒制备纳米磁珠中的用途。 2.一种纳米磁珠，包括核区和壳层，所述壳层包覆所述核区； 组成所述核区的材料为四氧化三铁纳米颗粒； 组成所述壳层的材料为硒代赖氨酸改性壳聚糖。 3.一种权利要求2所述的纳米磁珠的制备方法，包括： A1，将壳聚糖和硒代赖氨酸在EDC和NHS存在下反应，获得硒代赖氨酸改性壳聚糖； A2，铁前驱体溶液在碱性条件下反应，获得四氧化三铁颗粒； A3，采用凝聚沉淀方法将所述四氧化三铁颗粒与硒代赖氨酸改性壳聚糖溶液混合，获 得纳米磁珠。 4.权利要求2所述的纳米磁珠在核酸纯化中的用途。 5.根据权利要求4所述的用途，其特征是：所述核酸为天然来源的核酸或合成的核酸。 6.根据权利要求4所述的用途，其特征是：所述纳米磁珠在新型冠状病毒核酸纯化中的 用途。 7.一种新型冠状病毒核酸纯化试剂，包括权利要求3所述的纳米磁珠。 8.根据权利要求7所述的一种新型冠状病毒核酸纯化试剂，其特征是：所述核酸纯化试 剂还包括：洗涤I液、洗涤II液和洗脱液。 9.根据权利要求8所述的一种新型冠状病毒核酸纯化试剂，其特征是：所述洗涤I液包 括：Tris‑HCl 6‑12mM、乙酸钠0.5‑1.0M、0.1‑0.2M氯化锂、Tween‑20  1.2‑1.6wt％、乙醇50‑ 60％，其pH为6.0‑7.0； 所述的洗涤II液包括：Tris‑HCl 6‑12mM、氯化钠15‑25mM、乙醇50‑60％，其pH为6.0‑ 7.0； 所述的洗脱液包括：Tris‑HCl 6‑12mM，其pH为7.5‑8.5。