一种检测新型冠状病毒中和抗体的流式试剂盒及检测方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 113252908 A (43)申请公布日 2021.08.13 (21)申请号 202110639635.6 (22)申请日 2021.06.09 (71)申请人 泛肽生物科技（浙江）有限公司 地址 315000 浙江省宁波市江北区慈城镇 庆丰路777弄11#-2-1 (72)发明人 严崇虎　李国平　 (74)专利代理机构 浙江中桓凯通专利代理有限 公司 33376 代理人 李美宝 (51)Int.Cl. G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/569 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01) 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 (54)发明名称 一种检测新型冠状病毒中和抗体的流式试 剂盒及检测方法 (57)摘要 本发明提供了一种检测新型冠状病毒中和 抗体的流式试剂盒及检测方法；所述试剂盒包括 磁珠‑S‑RBD复合物和鼠抗人IgG‑生物素复合物。 所述检测方法为：通过所述磁珠‑S‑RBD复合物捕 获血浆里的中和抗体，并且交联所述鼠抗人IgG‑ 生物素复合物和SA‑PE；上机检测得到数据。采用 本发明的试剂盒结合流式细胞法可以测定样本 新冠病毒中和抗体的含量，能在30min内出结果， 采用本发明的试剂盒只需要简单操作，就能快速 诊断中和抗体，血液样本用量极少，只需1ul血浆 或血清，检测结果灵敏度极高，极微量的中和抗 A 体都可以检测出。 8 0 9 2 5 2 3 1 1 N C CN 113252908 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种检测新型冠状病毒中和抗体的流式试剂盒，其特征在于，包括磁珠‑S‑RBD复合 物和鼠抗人IgG‑生物素复合物。 2.一种如权利要求1所述的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： S10：获取磁珠和S‑RBD，化学交联得到磁珠‑S‑RBD复合物； S20：获取生物素和鼠抗人IgG，化学交联得到鼠抗人IgG‑生物素复合物。 3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述S10包括： S11：使用NHS和EDC对所述磁珠进行活化，分离清洗得到活化的磁珠； S12：在所述活化的磁珠中加入S‑RBD，吹打混匀，避光震荡包被得到所述磁珠‑S‑RBD复 合物。 4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述NHS和EDC的质量比为2：1。 5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述S20包括以下步骤： S21：对所述鼠抗人IgG进行脱盐处理，得到脱盐的鼠抗人IgG； S22：在所述脱盐的鼠抗人IgG中加入NHS‑biotin溶液，室温避光震荡，得到所述鼠抗人 IgG‑生物素复合物。 6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述NHS‑biotin溶液中，溶剂为DMSO。 7.一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，采用如权利要求1所述的试剂 盒，包括以下步骤： S30：将磁珠‑S‑RBD复合物、样本以及稀释液加入到96孔板里进行免疫反应，磁珠‑S‑ RBD复合物捕获所述样本里的中和抗体，形成磁珠‑S‑RBD‑中和抗体复合物； S40：所述磁珠‑S‑RBD‑中和抗体复合物跟鼠抗人IgG‑生物素进行免疫反应，形成磁珠‑ S‑RBD‑中和抗体‑鼠抗人IgG‑生物素复合物； S50：所述磁珠‑S‑RBD‑中和抗体‑鼠抗人IgG‑生物素复合物再和SA‑PE反应，形成磁珠‑ S‑RBD‑中和抗体‑鼠抗人