《DNA的粗提取》教学设计教学目标.docVIP

? ? ?课题1 DNA的粗提取与鉴定教学设计 弘文中学 王星月 一、教学目标 1知识目标 ?理解DNA的理化特性及根据其理化特性而提取和鉴定的原理。 ?2、能力目标 ?（1）初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。 ?（2）在对实验原理、步骤的理解和分析过程中发展学生的科学思维。 ?3、情感、态度、价值观 ?在科学实验过程中培养学生严谨比较细致、实事求是的科学态度。 ?二、教学重点 ?DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理 ?三、教学难点 ?DNA的粗提取与鉴定方法及其相关原理 四、教学过程 （一）导入： DNA存在于细胞中，如何从细胞中提取DNA呢？今天我们就学习一下DNA的粗提取和鉴定。 （二）自主学习 同学们可以带着以下几个问题学习课本P54-55页。 ①提取生物大分子和DNA的思路是什么？ ②DNA有哪些理化性质？ ③如何鉴定DNA？ （三）展评 1.提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法，分离具有不同物理或化学性质的生物大分子 提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质、脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分 DNA的物理性质 DNA和蛋白质的溶解性分析：DNA在0.14mol/L的氯化钠中溶解性最小，此时DNA析出，蛋白质溶解；继续加入氯化钠DNA溶解，蛋白质析出；通过这种方法就可以将DNA和蛋白质分离。 DNA的鉴定 DNA+二苯胺→蓝色（沸水浴条件） 学习了以上的基本知识，我们就可以进行DNA的粗提取了，过程是怎样的？注意哪些事项？ 我们一起学习一下第二部分实验设计。 （1）实验材料的选取 ①下列哪些材料可以进行实验？ 鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、哺乳动物红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、液体培养的大肠杆菌。 其中哺乳动物红细胞没有细胞核不能用于DNA的提取，其他都可以。 ②什么样的实验材料适合提取DNA？ DNA含量高，材料易得 我们以鸡血细胞液为例进行提取，为什么用鸡血细胞液比用鸡全血好呢？这是因为鸡全血中含有血浆，血浆中含有血浆蛋白等杂质。如何制备鸡血细胞液呢？我们将新鲜鸡血中加入柠檬酸钠，然后离心出现分层，去掉上清液，留下最下面的沉淀物，这就是鸡血细胞液。 （2）破碎细胞，获取含DNA的滤液 将获取的鸡血细胞液中直接加入清水，边加水边用玻璃棒搅拌，注意搅拌需要朝一个方向。此时红细胞吸水张破，获取含DNA的滤液，但是这个滤液中还可能有RNA，蛋白质、多糖、脂质等物质。所以还需要进一步除杂。 （3）除去滤液中的杂质 ①溶解核DNA：滤液+ →搅拌 ②析出DNA：+ →搅拌→直至 为止→过滤 →取 ③DNA再溶解：DNA黏稠物+ →搅拌→过滤→取 为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？ 用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。 （4）DNA的析出与鉴定 析出： 加入与滤液体积 、 的酒精溶液（体积分数 ），静置 min，溶液中会 出现 ，这就是粗提取的 。用玻璃棒沿 方向搅拌，卷起丝状 物，并用 吸去上面的水分。 鉴定： 将白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，DNA＋二苯胺→蓝色（沸水浴） 课外拓展：植物细胞--洋葱DNA粗提取 （1）实验材料的选取 （2）破碎细胞，获取含DNA的滤液 切碎→加洗涤剂和食盐 → 搅拌、研磨→过滤→滤液 洗涤剂—— 能溶解细胞膜，利于DNA释放 食 盐—— 有利于DNA溶解于研磨液中 研磨的目的：破碎细胞壁，使细胞核内的DNA释放。若研磨不充分，会使提取的DNA量变少。 （3）除去滤液中的杂质 加入嫩肉粉或者高温60-75℃处理10-15min，进行除杂。 （4）DNA的析出与鉴定 同上 四、总结注意事项（1）以血液为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠防止血液凝固。（2）加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。(3)用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，沿同一方向搅拌，不要碰到烧杯壁，以免DNA分子的断裂。（4）二苯胺试剂要现配现用. (5)盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。 玻璃容器会吸附DNA，DNA提取量会减少。 五、当堂测 1.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色 2.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯