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高致病性禽流感血凝HA;介绍;介绍;试验原理、用途;试验准备工作;2、1%鸡红细胞悬液制备 采血 用注射器吸收阿氏液1ml, 取最少3只SPF公鸡或无禽流感和新城疫等抗体健康公鸡血液3-4ml, 与等量阿氏液混匀, 装入离心管中备用。 洗涤红细胞 将离心管中血液经过1500-1800r\min离心8分钟, 弃去上清液, 在沉淀物中加入本试验要求PBS液, 轻轻混匀, 以均匀沉淀红细胞, 在经过1500-1800r\min离心8分钟, 用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层白细胞薄膜, 再反复2次以上过程后, 4℃保留备用。  1%鸡红细胞悬液制备 用微量移液器取洗涤后红细胞沉淀泥0.1ml, 加入到9.9ml本试验要求PBS液, 轻轻混匀, 制成1%鸡红细胞悬液, 备用。;3、pH7.2、0.01mol/L PBS配制a) 配制25×PB: 称量2.74g磷酸氢二钠（Na2HPO4 12H2O）和0.79g磷酸二氢钠（NaH2PO4 2H2O）加蒸馏水至100mL。b) 配制1×PBS: 量取40ml25×PB, 加入8.5g氯化钠, 加蒸馏水至1000mL。c) 用氢氧化钠或盐酸调pH至7.2。d) 灭菌或过滤。e) PBS一经使用, 于4℃保留不超出3周。 PBS对其它酸碱物质含有一定缓冲能力, 维持反应所需pH, 所以比使用生理盐水效果好。 ;仪器及诊疗液等准备 96孔V型微量血凝集反应板、微量吸液器、混合振荡器、恒温培养箱、待检血清、鸡新城疫标准阳性血清和阴性血清、 pH7.2、0.01mol/L PBS 、1％鸡红细胞悬液。  稀释禽流感病毒H5亚型抗原: 用注射器吸收本抗原要求剂量加入PBS液稀释好备用。 稀释禽流感H5亚型标准阳性血清: 用注射器吸收本血清要求剂量加入PBS液稀释好备用。 待检血清要新鲜、无杂质、无红细胞、不腐败, 盛血清容器要清洁。注意: 全部试剂及待检血清在试验前必需恢复室温, 且室内温度保持在（20-25 ℃）;血凝（HA）试验;血凝试验（抗原效价测定）操作表;抗原效价测定结果判定;抗原回归试验;血凝试验（抗原效价测定）操作表; 1×单位抗原孔红血球必需达成100%凝集, 同时0.5×孔红血球达成50%凝集, 50%下沉孔底才符合要求, 不然重新调配。;血凝抑制试验 ;血凝抑制试验操作表;血凝抑制试验结果判定;;