HPLC法测定人唾液中卡马西平浓度及其药代动力学.docVIP

HPLC法测定人唾液中卡马西平浓度及其药代动力学 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：HPLC法测定人唾液中卡马西平浓度及其药代动力学 1 1材料和方法 2 文2：HPLC法测血清奥氮平浓度 5 1材料和方法 5 (2)标准物奥氮平标准对照品。 6 （4）·10H2O于100ml容量瓶中加双蒸水至刻度。 6 （1）色谱条件 6 （2）病人标本收集和保存 7 2 计算 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 10 正文 HPLC法测定人唾液中卡马西平浓度及其药代动力学 文1：HPLC法测定人唾液中卡马西平浓度及其药代动力学 0引言 卡马西平（carbamazepine， CBZ）是临床上常用的抗癫痫药. 由于此药的药代动力学个体差异大，吸收不规则，血药浓度 治疗 窗窄（4~12 mg#12539;L-1）,容易引起毒副反应［1］. 为保证药品质量及临床疗效，把好临床合理用药关［2-4］，有必要对其进行血药浓度监测和个体化用药. 但血样采集常增加患者痛苦，且操作较繁琐［5］，尤其对于婴幼儿更为不便. 而唾液取样具有无创伤、 经济 简便、易于接受等优点. 为探讨用无创伤性生物制品取代血样的新途径，通过监测唾液中药物浓度,实现个体化用药,并在社区、家庭推广，取代传统的患者到 医院 门诊抽取血样的不方便模式，我们利用HPLC法测定卡马西平唾液浓度，并通过药代动力学研究，考察其适用性［6］ 1材料和方法 材料① 对象健康受试者6（男3，女3）名，年龄20~25岁，平均（±）岁；体质量42~65 kg，平均（±） kg. 肝肾功能正常，受试前1 wk及受试期间未接受其他药物. 每位受试者均自愿参加实验，详细了解实验过程并签署知情同意书. ② 仪器LC10AVP高效液相色谱系统（Shimadzu，Japan）：含两台LC10ATvp型泵，7725型进样阀（配100 μL定量环），CTO10Asvp柱箱，Classvp 色谱工作站(Shimadzu，Japan)，Shimpack CLCODS C18不锈钢分析色谱柱（150 mm×6 mm，5 μm），3D紫外检测器；涡旋混合器（XW80型，上海第一医学院仪器厂）；高速离心机（ABBOTT，USA）. ③ 药品与试剂卡马西平片：上海复旦复华药业有限公司生产，批号卡马西平标准品： 中国 药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱级,其他试剂均为分析纯. 色谱条件色谱柱：Shimpack CLCODS C18柱（150 mm×6 mm，5 μm）；流动相：甲醇水(53∶47)；流速1 mL#12539;min-1；检测波长212 nm；柱温为室温；进样量100 μL. 方法 标准液的制备精密称取 mg的CBZ标准品，置于50 mL量瓶中，用甲醇定容，即得浓度为 g#12539;L-1的CBZ标准液. 标准曲线制备取正常人混合空白唾液1 mL 5份，分别加入CBZ标准液5，12，24，38和54 μL，配成浓度分别为，，，和 mg#12539;L-1的系列标准样品. 取待测样品150 μL，加入蛋白沉淀剂150 μL，振荡混匀后高速离心5 min（4500 g）,取上清液100 μL进样. 以峰面积为纵坐标（A），CBZ浓度为横坐标（C），进行线形回归，得回归方程：C=(r=， n=6)，唾液中CBZ浓度在~ mg#12539;L-1范围内线形关系良好. CBZ的最低检测浓度为30 μg#12539;L-1（S/N≥3） 方法专属性将空白唾液、CBZ标准溶液及供试样品分别进样，其三维图谱分别见Fig 1. 在本色谱条件下，CBZ的保留时间为 min，唾液中蛋白质等干扰物质与CBZ可达基线完全分离，确保分析方法的专一性. 方法回收率和精密度按“标准曲线制备”项下操作，对已知含CBZ ，， mg #12539;L-1低、中、高3种浓度的唾液供试品，于同日内连续测定5次， 计算 其日内精密度；对上述3种浓度样品于5 d内分别进行测定，计算日间精密度；同时计算方法回收率(Tab 1) 实验设计6名受试者实验前禁食12 h，于次日晨起空腹采集唾液2 mL(空白对照)，随即口服CBZ片剂200 mg；并于服药后, 3, , 6, , 9, , 12, 24, 72, 144和216 h收集唾液2 mL，按“标准曲线制备”项下方法测定唾液中CBZ浓度. 表1HPLC法测定唾液中卡马西平的方法回收率和精密度　(略) 图1卡马西平色谱图　(略) 2结果 经 计算 ，6名健康受试者口服200 mg CBZ后的平均药时曲线见Fig 2. 消除速率常数ke用消除相中对数药物浓度时间回归曲线