hplc和其在中药分析中的应用.ppt

HPLC和其在中药分析中的应用;;按溶质在分离过程中 原理: 吸附色谱 分配色谱 离子交换色谱 体积排阻色谱 亲和色谱;按色谱固定相 形式: 平板色谱（平面色谱） 柱色谱 按分离 压力 高压液相色谱（高效液相色谱） 中压液相色谱 常压液相色谱;H－dp关系图;通常也把吸附色谱法称为液固色谱法。液固色谱法 固定相通常为固体吸附剂, 常见 是: 碳酸钙、硅胶、氧化铝、氧化镁、活性炭等。其中硅胶最为常见。 吸附色谱对中等分子量 油溶性样品可取得最好 分离, 而对强极性或离子型 样品, 有时会发生不可逆吸附, 不能得到满意 结果。;吸附剂通常为多孔性 物质, 在它们 表明存在着分散 吸附中心, 溶质分子和流动相分子在吸附剂表面 活性中心上进行竞争, 同时不一样溶质之间和同一溶质 不一样官能团之间液也存在竞争。竞争 综合结果就是形成不一样溶质在吸附剂表面吸附、解吸平衡。;吸附;键合相固定相: 在硅胶 表明用键合反应把官能基团键合到表面上, 处理固定相流失 问题。 正相色谱: 流动相极性比固定相极性小 反相色谱: 流动相极性比固定相极性大;高效液相色谱——固定相;固定相 其她性能;通常认为键合相色谱 机理分配色谱机理, 也有些人认为它是吸附色谱机理, 其实应该是有两种成份在里面, 现在又有疏溶剂理论等机理 提出。;高效液相色谱仪器;储存和输送液体设备 进样系统 柱系统 检测器 控制和数据处理系统;选择流动相 标准: 保持色谱柱 稳定性 化学惰性 适合所用 检测器 对样品有一定 溶解能力 清洗、更换方便、毒性小 沸点、粘度等物理性质适宜;反相色谱最常见 流动相: 水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、异丙醇等。 水－甲醇体系: 大约50％水 时候粘度最大 水－乙腈体系: 35％水 时候粘度最大。;存放流动相 容器一定要惰性 , 而且有机溶剂要避光。 输液泵要求流量平稳,能够调整 流量范围宽, 耐高压。 通常是柱塞往复泵。;2021/12/6;流动相 混合输入和洗脱方法;高效液相色谱仪器——泵系统;进样系统包含手动进样和自动进样 不管手动进样还是自动进样, 都要经过六通阀。六通阀进样是高压系统 需要, 既不???响系统 正常运行又能够让样品进到系统中去。;2021/12/6;高效液相色谱仪器——进样器;反相键合相色谱柱最常见 就是ODS柱, 也就是C18柱。 柱温箱 温度控制要求比较正确, 因为流体 粘度受温度 影响较大。;测量原理不一样分类: 光学性质检测器 电学和电化学性质检测器 热学性质检测器;紫外－可见光检测器 示差折光检测器 荧光检测器 蒸发光散射检测器 化学发光检测器 ;高效液相色谱仪器——检测器;紫外吸收检测器有三种类型: 固定波长紫外吸收检测器: 低压汞灯提供固定254nm或280nm紫外光。 可变多波长检测器: 氘灯做光源, 光栅分光 光二极管阵列检测器photo－diode－array detector（PDAD, PDA, DAD）: 钨灯和氘灯组合光源, 进入检测池 不是单色光, 而是一段紫外波长上 光。 PDA 能够辅助定性。;DAD检测器3D图;示差折光检测器（refractive index detector RID）: 溶液 折射率等于溶剂及其中所含各组分溶质 折射率与其各自 摩尔分数 乘积之和。 RID是通用型 检测器, 不过灵敏度不高。 RID不能用于梯度洗脱。;蒸发光散射检测器;安培检测器 电导检测器 库仑检测器 介电常数检测器 极谱检测器;完成数据采集和对仪器 控制。;超高效液相色谱仪（ UPLC）;高效液相色谱法在药典中 应用;HPLC与TLC比较( );HPLC在中药质量分析和检测中 应用;有效成份、指标成份 检测;Flavones, Flavanones, and Flavanone Glycosides ;Ginkgolides ;杂质或相关物质检验;添加物或有害残留物质 检测;添加物或有害残留物质 检测;中药指纹谱分析;; HPLC方法应用;有效成份\特征成份含量测定;有效成份\特征成份含量测定;多成份指标含量测定;ELSD检测方法应用;银杏叶提取物中银杏酸 限量检验;;高效液相色谱法附录修订内容( );高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。 ? ;对仪器 通常要求( );对仪器