六味地黄丸中丹皮酚的含量测定方案.pdfVIP

六味地黄丸中丹皮酚的含量测定方案 一、设计背景 随着医药行业的不断发展，更多的研究者在研究中医药剂中的含量时，选择利用实 验及结合医学要点分析其特点及功效。六味地黄丸 （如图 1 北京同仁堂的产品）是一种 中药配方制剂，处方由六味中药共同组成，分别为熟地、山茱萸、山药、泽泻、牡丹皮、 茯苓，故名为 “六味地黄丸”。方中的每味中药都有各自的疗效和作用：其中的熟地主要 起滋补肾阴的作用，山茱萸主要起滋补肝肾的疗效，而山药能补脾阴，综上可知，补肾 阴是六味地黄丸的主要功效；组方中的茯苓则可利水泄浊，牡丹皮清相火，泽泻的作用 是祛湿浊，所以六味地黄丸的配方是三补加三泻，三味补药是熟地、山萸肉、山药，三 味泻药是茯苓、泽泻、牡丹皮，本中药配方补中有泻，泻中有补。六味地黄丸临床上主 要用于肾阴不足、潮热盗汗、口干、 腰膝酸软、头晕耳鸣、骨蒸潮热、盗汗遗精类等症 状。而丹皮酚 （其化学结构式见图 1）是六味地黄丸组方中丹皮中的主要有效成分，也 是指标成分，丹皮酚具有解热、镇痛、抗炎以及抑制变态反应的作用，还具有镇静、催 眠、抗菌、抗炎、抗氧化、降血压的疗效，所以丹皮酚的含量可以作为六味地黄丸质量 控制指标中的一项。本方案拟对六味地黄丸中丹皮酚的含量测定方法进行设计，旨在为 六味地黄丸的质量标准的提高提供相关参考依据。 图 1 六味地黄丸 图2 丹皮酚 二、设计依据 经查阅 “中国知网”相关的期刊文献资料及 《中国药典》（2020 年版）中的内容得 知，目前，可用于丹皮酚含量测定方法主要以下两种有仪器分析方法：紫外-可见分光光 度法和高效液色谱法。很多研究者在以往的实验中发现，紫外-可见分光光度法专属性较 差，只适合用于测定稀溶液，制剂中的辅料对其测定的干扰较大，样品处理麻烦，仪器 操作较复杂，测量结果不够准确。而高效液相色谱法具有操作简单、分离效果好、检测 快速、分析精密度高、结果准确度好等优点，适合测定制剂中的有效成分的含量，资料 中有关采用高效液相色谱法测定制剂中主要成分含量的文献较多。综合考虑，结合所查 有关丹皮酚含量测定的相关文献资料，本方案拟采用高效液相色谱法对六味地黄丸中丹 皮酚的含量进行测定，同时为今后的学习和研究奠定理论和实践上的基础。 三、设计方案 1.仪器与试剂 本设计采用岛津高效液相色谱仪 （厂家：日本岛津公司，型号：LC-10AVP），SPD-M AVP 10 二级管阵列检测器 （厂家：日本岛津公司，型号：SPD-10A VP），Hangpinc-FA2004N 型 电子天平 （厂家：步青科技有限公司）。 丹皮酚对照品 （中国食品药品检定研究院，纯度 99.8%），六味地黄丸 （厂家：北京 同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，规格：浓缩丸，120 丸/盒，每 8 丸等同于 3 克饮 片），甲醇 （色谱纯，国药集团工业股份有限公司），乙腈 （色谱纯，国药集团工业股份 有限公司），甲酸 （分析纯，国药集团工业股份有限公司），水为纯化水。 2.色谱条件 色谱柱 （YMC-Pack ODS-A）(4.6mm ×200mm，5 μm)，以乙腈-0.1%甲酸水溶液 （45 ∶ 55）为流动相 （可根据试验结果调整甲酸的含量和流动相的比例，以达到最佳分离效果）， 流动相的流速设置为 1.0ml/min，检测波长为 274nm （可根据实验结果，选择在丹皮酚的 最大吸收波长处测定），色谱柱的柱温为 35℃，进样体积 10 μl。 3.溶液的配制 （1）供试品溶液的制备 取六味地黄丸适量，用研钵研磨均匀，取研磨均匀后的供试品约 0.5g，精密称定， 置于 100ml 具塞锥形瓶中，精密量取 25ml 溶剂 （50%甲醇溶液）加入具塞锥形瓶，摇匀， 密塞，称定重量，加热回流 1 小时，放冷至室温，然后称定锥形瓶及溶液的重量，用 50% 甲醇补足锥形瓶中减失的重量，摇匀具塞锥形瓶中的溶液，溶液经滤纸过滤，取续滤液， 即得供试品溶液，室温放置，待用。 （2）对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品约 25mg，精密称定，置于 50ml 容量瓶中，加入甲醇使溶解并稀释 至刻度线，制成每 1