辅酶Q10软胶囊含量测定方案.pdfVIP

辅酶Q 软胶囊含量测定方案 10 一、设计背景 辅酶Q 又名泛醌 10。其化学名称为：2-(3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-十甲基 10 -2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-四十癸烯基)-5,6—二甲氧基-3-甲基-p-苯醌，外观为黄 色至橙黄色结晶性粉末；无臭无味；遇光易分解；不溶于水，易溶于正己烷等有机溶剂， 是脂溶性醌类化合物。辅酶Q 广泛存在于自然界，如猪肝、牛肉、沙丁鱼、鸡蛋、西红柿、 10 花椰菜这些都含有辅酶Q ，但食物含有辅酶Q 的量有限，而且身体难吸收。辅酶Q 在人 10 10 10 体内参与细胞能量制造及活化，是预防动脉硬化形成最有效的抗氧化成份。功能用途十分 广泛：抗衰老、抗疲劳、抗氧化、抗肿瘤、抗高血压、保护皮肤、保护心脏。临床用于急 慢性肝炎,轻中度充血性心功能不全及癌症等的辅助治疗。其含量又是影响药品合格的重要 依据，应该根据药品的各个方面进行考虑。根据 《中国药典》2020年版二部记载，为检测 其含量建立了高效液相色谱法。 二、设计依据 根据 《中国药典》2020年版二部记载，辅酶Q 的含量方法采用反相高效液相色谱法。 10 辅酶Q 软胶囊含量测定将从系统适用性和色谱条件两方面进行。其中色谱条件：用硅胶作 10 为填充剂；以正己烷—乙酸乙酯（97：3）为流动相；流速每分钟2.0ml，检测波长为275nm， 进样体积为20μl。本方案之所以选择高效液相色谱法是因为它拥有以下优点：（1）高压； （2）高效；（3）高灵敏度；（4）应用范围广；（5）分析速度快、载液速度快；（6）色谱柱 可反复使用，样品不被破坏，易回收。 三、设计方案 （一）仪器与试药 1.仪器及材料 高效液相色谱仪(上海伍丰LC-100PHP型）、电子天平、光照箱、紫外分光光度仪、0.45 μm 的有机微孔滤膜。 2.试药 辅酶Q 对照品、辅酶Q 软胶囊、甲醇 （色谱纯）、正己烷 （色谱纯）、乙酸乙酯 （色 10 10 谱纯）、无水乙醇为分析纯。 3.乙醇的性质及安全注意事项 性质：乙醇是一种易燃，易发挥的无色透明液体，低毒，具有特殊香味并有刺激的辛 辣滋味。 注意事项：（1）密闭操作，防止泄露，工作场所保持全面通风。 （2）远离火种，热源，工作场所严禁吸烟。 （3）避免与氧化剂接触。 4.高效液相色谱仪的操作方法 （1）过滤流动相，根据流动相性质选择不同的滤膜，过滤甲醇应选用有机膜。流动相 抽滤后再超声脱气10-20分钟。 （2）更换本次色谱柱硅胶，连接好流动相管道，打开高效液相色谱仪及计算机软件， 连接检测系统。 （3）进入高效液相色谱仪控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。 （4）更换流动相正己烷—乙酸乙酯 （97：3），先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵 的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start， 冲洗速度5ml/min。 （5）调节流量，观察压力，一般不要超过2000。点击injure，选用流速2.0ml/min， 点击on，走基线，观察基线情况。 （7）建立一个新的方法，点击newmethod。选取需要的配件，包括进样阀，泵，紫外 检测器等。选完后，点击protocol。 （8）进样和进样后操作。选定方法，点击start。样品均需过滤，然后进样20μl。 方法走完后，点击postrun，记录图谱和数据等。全部样品走完后，继续走一段基线，洗 掉残留物。 5.高效液相色谱仪使用注意事项 （1）所用流动相甲醇、正己烷、乙酸乙酯必须用HPLC级的试剂，使用前用0.45μm 或更细的膜过滤，除去其中的颗粒性杂质和其他物质。 （2）流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。