阿奇霉素颗粒的质量检测方案.pdfVIP

一、选题背景 阿奇霉素颗粒为微囊包裹的细颗粒, 该药物的有效成分阿奇霉素为15元环大环内酯 类抗菌药物, 通过抑制细菌蛋白质的合成而起作用, 具有抗菌谱广、不良反应小等优点。 其作为新一代的抗生素，经过了化学结构修饰，所以具有很多优势。举例来说,其抗菌谱 更为广泛，在酸性环境中稳定性更强，吸收效果更为出色，所以具有很高的生物利用度。 该药品成分具有较强的半衰期,由于感染部位细胞浓度较高,所以可以向病灶进行定向转 运，毒性较低，并且具有较强的耐受性。 目前该药物主要适用于敏感细菌所引起的下列感染：支气管炎、肺炎等下呼吸道感 染；皮肤和软组织感染；急性中耳炎；鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染 （青霉 素是治疗化脓性链球菌咽炎的常用药，也是预防风湿热的常用药物。本次设计研究对象 为湖南千金湘江药业股份有限公司生产的阿奇霉素颗粒(批号规格:0.1g) 关于这种药物含量分析的方法，在美国药典和我国官方修订的新药标准中都已经有 所收录，在美国药典中，其采用的方式为反向氧化铝柱以及安培电检测，但是该方法所 需的设备对于当前国内的水平来说仍然十分复杂，条件比较苛刻。这给方法本身的推广 带来了很大的难度。在我国官方修订的很多相关标准中，其含量分析的方式为微生物法。 该方法操作烦琐、重复性差，不利于实际生产中对阿奇霉素进行质量控制。为此，本设 计方案参照 《中国药典》和相关文献，采用反相高效液相色谱 (RP-HPLC) 法测定阿奇 霉素颗粒中主药的含量, 该方法较为简便快速，可为该制剂的质量控制提供参考。 二、设计依据 2020版《中国国家药典》中规定阿奇霉素颗粒的含量应按高效液相色谱法进行测定。 针对阿奇霉素颗粒，当前最主要的检测方法有微生物法、高效液相色谱法 （HPLC）、反 相高效液相色谱法 （RP-HPLC）等。由于微生物法操作较为复杂，容易导致出现较大误 差，且高效液相色谱法会出现辅料干扰情况，此次方案选择使用反相高效液相色谱检测 方法。 反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系，它正好 与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系 （正相色谱）相反。RP-HPLC是 当今液相色谱的最主要的分离模式，该方法几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中 的有机物的分离，适于分离非极性、极性或离子型化合物。当今大部分的分析任务皆可 由反相色谱法完成。 在反相高效液相色谱法中使用的是非极性键合固定相。它是将全多孔 （或薄壳）微 粒硅胶载体，经酸活化处理后与含轻基链(C18)的硅烷化试剂反应，生成表面具有烷基的 非极性固定相。如共价结合到载体上的直链碳氢化合物正辛基等。关于反相色谱的分离 机理，吸附色谱的作用机制认为溶质在固定相上的保留主要是疏水作用，在高效液相色 谱中又被称为疏溶剂作用。根据疏溶剂理论，当阿奇霉素分子进入极性流动相后，即占 据流动相中相应的空间，而排挤一部分溶剂分子。当其被流动相推动与固定相接触时， 分子的非极性部分或非极性因子会将非极性固定相上附着的溶剂膜排挤开，而直接与非 极性固定相上的烷基官能团相结合 （吸附）形成缔合络合物，构成单分子吸附层。这种 疏溶剂的吸附作用是可逆的，当流动相极性减少时，这种疏溶剂斥力下降，会发生解缔， 并将阿奇霉素分子解放而被洗脱下来。 三、设计方案 （一）材料与设备 材料：阿奇霉素对照品 (中国食品药品检定研究院提供, 批号:130593-201002, 供含 量测定用，质量分数:94.3%) ，阿奇霉素颗粒(湖南千金湘江药业股份有限公司, 批号: 规格:0.1g)，乙腈 （色谱纯），磷酸氢二钾、磷酸 （分析纯），纯化水。 设备：LC-2010AHTHPLC仪 (紫外检测器)；LC-2010 自动进样系统、CLASS-VP ver.6.1色谱数据工作站 (日本岛津公司)；BOLONGUSC-302超声波清洗器 (上海波龙电子 设备有限公司)；BP-211D 电子天平 (德国赛多利斯公司)。 （二）色谱条件 色谱柱:AgilentZORBAXExtend-C18柱 (150mm×4.6mm，5µm) 流动相:磷酸盐缓冲液 (取浓度为0.05mol/L的磷酸氢二钾溶液, 用质量分数为20%的 磷酸溶液调节pH至8.2)-乙腈 (45 ∶55,V/V) 检测波长:210nm 流速:1.0ml/min 进样量:20μl 柱温:30℃ （三）操作步骤 1.溶