《动物生物化学实验》教学大纲.docVIP

《动物生物化学实验》教学大纲 一、课程基本信息 课程代码 课程名称：动物生物化学 课程英文名称：Animal Biochemistry 课程所属单位：饲料科学系动物营养教研室 课程面向专业：动物科学、水产养殖学专业 课程类型：必修课 先修课程：有机化学 学分：5 学时：80 应开实验项目个数： 8 二、课程性质与目的 通过本课程（实验）的教学，使学生掌握生物化学实验的基本操作及实验技术，掌握生物大分子的分离纯化、定性、定量、化学性质、生物活性的鉴定，掌握和了解组织代谢和能量释放转变和贮存与代谢调节过程中的代谢产物和间产物的定性、定量分析鉴定实验。 三、课程内容与要求 实验一 唾液淀粉酶活性的观察 （4学时） 基本要求：掌握影响酶活性的因素 主要内容：观察温度、pH对酶活性的影响 操作要点：采取唾液，稀释，观察不同pH环境下酶的活性及酶反应的特异性 主要仪器设备：白瓷板（或比色板）、恒温水浴锅、电炉 实验二 血糖的测定 （4学时） 基本要求：掌握血糖的测定方法 主要内容：血糖的测定 操作要点：制作高标准血糖管、低标准血糖管 主要仪器设备：试管及试管架、水浴锅、721型分光光度计 实验三 血清总蛋白含量的测定 （4学时） 基本要求：掌握血清总蛋白含量的测定方法 主要内容：制备标准血清，测定血清总蛋白 操作要点：配试剂，制备标准血清，比色 主要仪器设备：721型分光光度计 实验四 氨基酸的纸上层析与氨基酸的转移作用 （4学时） 基本要求：掌握层析的原理，氨基酸的转氨基作用 主要内容：制备组织液，层析 操作要点：制备组织液，加样，层析，干燥，显色 主要仪器设备：组织匀浆器，层析缸，电吹风 实验五 等电聚焦法测定蛋白质等电点 （4学时） 基本要求：掌握蛋白质等电点的概念，等电聚焦法测定蛋白质等电点的原理 主要内容：制胶，电泳 操作要点：制胶、加样、聚合、电泳、固定、数据处理 主要仪器设备：多功能电泳仪、等电聚焦电泳槽、凝胶管 实验六 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳 （4学时） 基本要求：掌握电泳的一般原理、醋酸纤维素薄膜电泳操作枝术 主要内容：制备醋酸纤维薄膜，电泳 操作要点：醋酸纤维素薄膜的润湿与选择、电泳槽的准备、点样、电泳 染色与漂洗、透明、结果判断与定量 主要仪器设备：多功能电泳仪及卧式水平电泳槽、可见光分光光度计、吹风机 实验七 血清球蛋白的提取 （6学时） 基本要求：掌握动物血液样品制备、大分子蛋白质的分离、提纯 主要内容：动物血液样品的制备、蛋白质的分离、提纯 操作要点：采集动物血液、低温离心，分离血清，血清蛋白盐析沉淀、透析除盐 主要仪器设备：家兔、注射器、采样管（螺口）、低速冷冻离心机、恒温培养箱、层析冷柜 实验八 组织DNA与RNA的分离和提纯 （4学时） 基本要求：掌握组织DNA与RNA的分离和提纯技术 主要内容：DNA与RNA的提纯 操作要点：采取组织，匀浆破碎细胞，离心，洗涤，沉淀，分离 主要仪器设备：超低温冰箱，生物安全柜，电热恒温水槽，台式高速冷冻离心机 实验九 紫外分光光度法定量检测DNA与RNA （4学时） 基本要求：掌握测定DNA与RNA含量的原理 主要内容：紫外分光光度法定量检测DNA与RNA 操作要点：组织提取DNA与RNA，稀释，测定 主要仪器设备：紫外可见光分光光度计 实验十 DNA的琼脂糖电泳 （4学时） 基本要求：掌握琼脂糖电泳的原理及操作方法 主要内容：DNA的琼脂糖电泳 操作要点：制胶，加样，电泳，测定 主要仪器设备：水平电泳槽，多功能电泳仪，微量加样器，层析冷柜，凝胶成像系统含工作站 实验十一 多聚酶链式反应 （4学时） 基本要求：掌握多聚酶链式反应的方法 主要内容：体外扩增DNA 操作要点：变性，退火，DNA链延伸 主要仪器设备：台式高速离心机，可调式取液器，PCR自动扩增仪，SDSPAGE电泳仪，层析冷柜，凝胶成像系统含工作站 四、学时分配 实验学时分配表 序号 实验项目（或内容）名称 实 验 学 时 实验类型 每组 实验 人数 说 明 验 证 性 设 计 性 综 合 性 其 它 1 唾液淀粉酶活性的观察 4 √ 2 必开 2 血糖的测定 2 √ 2 必开 3 血清总蛋白的含量测定——双缩脲法 2 √ 2 必开 4 氨基酸的纸上层析与氨基酸移换作用 4