关于补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响.docVIP

关于补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响.doc

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关于补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1:关于补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响 1 1 材料与方法 2 2 结果 4 3 讨论 4 文2:活血降脂方对大鼠实验性高脂血症的影响 5 1 材料与方法 6 2 结 果 8 3 讨 论 8 参考文摘引言: 9 原创性声明(模板) 11 文章致谢(模板) 11 正文 关于补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响 文1:关于补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响 Key words:Buqi Huoxue Decoction;Alzheimer’s disease;multi-factor injury;β-AP;growth factor;rat 长期以来,对于老年性痴呆(AD)治疗的实验研究多局限于单因素的动物模型,不能充分体现AD与衰老及多种环境因素相关的病理机制。本研究采用多种方法相结合建立多因素损伤AD大鼠模型,用放射免疫分析方法检测模型大鼠血清β淀粉样蛋白(β-AP)、转化生长因子(TGF-α)及类胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的含量,探讨中药补气活血方对其影响及其的作用机理。 1 材料与方法 动物 Wistar大鼠70只,雌雄各半,清洁级,体重(300±20)g,黑龙江中医药大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(黑) 药物、试剂与仪器 补气活血方系古方补阳还五汤为基础加减而组成的经验方,由黄芪、党参、当归、茯苓、远志、赤芍、川芎等组成,制成浓缩液(含原药材 g/mL),黑龙江中医药大学制剂室提供。喜得镇为瑞士山德士药厂与天津华津制药厂联合生产;D-半乳糖由上海试剂二厂生产;氢溴酸东莨菪碱注射液(SCOP)由上海禾丰制药有限公司提供;喹啉酸(QA),美国Sigma公司产品。脑立体定位仪(SN-ZM,日本);大鼠跳台仪。 造模与分组 大鼠适应1周后进行跳台实验,剔除不合格者,称重后随机分成正常组(A组)、假损伤组(B组)、模型组(C组)、补气活血方组(D组)、喜得镇组(E组),每组15只。除A、B组外,其余各组均予D-半乳糖5O mg/(kg·d),皮下注射6周,造成亚急性衰老模型[1-2]。C、D、E组同时每日喂饲AlCl3水溶液20 mg/mL×6周,B组予以等量的生理盐水。6周后将QA注入亚急性衰老大鼠海马。具体方法:将大鼠用3%的戊巴比妥钠30 mg/kg经腹腔麻醉后,固定在脑立体定位以上,于颅顶正中切口,钻开颅骨,以微量注射器垂直进针,用 mol/L pH 的PBS缓冲液溶解的QA 1 μL(含QA 150 nmol/2 μL)缓慢注入两侧海马,B组注入 mol/L pH 的PBS缓冲液1 μL,每侧注入时间为5 min,留针时间5 min,局部消毒后,缝合皮肤。最后C、D、E组大鼠于实验观察前15 min前给予腹腔注射SCOP 2 mg/kg,B组给予等量的生理盐水。剔除造模过程中死亡及不成功大鼠,最后每组取10只进行检测。 给药 D、E组大鼠于注射QA后第1O日开始分别连续灌胃,其余各组予以生理盐水灌服,以上各组均按10 mL/(kg·d)灌胃,连续3周。 观测指标 大鼠跳台实验 腹腔注射SCOP或生理盐水后进行试验,测试学习能力。将大鼠放入跳台仪内适应环境5 min,然后通电,大多数大鼠跳上跳台逃避电击。从通电到完全稳定上台所用的时间为潜伏期,跳下时大鼠双足同时接触铜栅视为错误反应,训练5 min并记录5 min内的潜伏期和错误次数作为学习指标。24 h后重测,先将大鼠放在跳台上,记录大鼠第1次跳下跳台时间为潜伏期,并记录错误次数作为记忆能力指标。 血清β淀粉样蛋白、转化生长因子及类胰岛素样生长因子Ⅱ水平检测 给药3周后大鼠股动脉取血分离血清,血清β-AP、TGF-α及IGF-Ⅱ检测采用放免法。放免试剂盒由北京福瑞生物工程公司提供。检测由哈尔滨医科大学附属二院同位素室完成。 统计学方法 实验数据经软件统计,组间进行t检验。 2 结果 (见表1、表2)表1 各组大鼠学习、记忆能力的比较(略) 注:与B组比较,*P,**P;与C组比较,▲P,▲▲P(下同) 表2 补气活血方对大鼠血清β-AP、TGF-α及IGF-Ⅱ水平的影响(略) 3 讨论 目前的研究进展表明,虽然AD的确切病因尚不十分清楚,但与机体的衰老、某些环境危险因素引起的某些基因突变或先天性基因脆弱有关。理想的AD模型应该考虑上述多病因综合作用,并能模拟出具有AD特征性的脑NFT、P物质及胆碱能系统损害等病理变

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