微生物的遗传变异和育种课件课件.pptVIP

Ames test测定潜在化学治癌物 理论依据 一切生物的遗传物质基础都是核酸尤其是DNA，所以任何能改变核酸结构的因素都可引起核酸生物学功能的改变。 生物化学统一性法则 生物的“三致”（致突变、致畸变、致癌变）物质可引起核酸结构的改变，从而引起其功能的改变；反之亦然。 基本原理 Salmonella typhimurium 的his-菌株在[-]的平板上不能生长，如发生回复突变，则能生长。 第62页，共102页，编辑于2022年，星期日 试验步骤： 可疑“三致”试样 + 鼠肝匀浆 S.t his- [-] 吸入滤纸片 保温 S.t his+ [-] 阳性 阴性 培养 第63页，共102页，编辑于2022年，星期日 1、某突变菌株在基本培养基上无法生长，而在添加了0.1%碱水解酵母核酸后，该菌株能生长。请设计一实验方案以进一步确定该菌株的生长必需物。 2、什么叫做营养缺陷型菌株?在实验室中如何从原养型菌株获得营养缺陷型菌株?请设计一个具体实验方案。 3、怎样用实验证明突变是自发产生的，而不是受环境诱导产生的？ 作业题 第64页，共102页，编辑于2022年，星期日 第三节 基因重组 (gene recombination) 第65页，共102页，编辑于2022年，星期日 基因重组的定义 两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定基因组的过程称为基因重组或遗传重组，简称重组。 重组和杂交的关系 重组是在核酸分子水平上的杂交，与细胞水平上的杂交有明显区别 杂交中必然包含着重组，而重组则不限于杂交一种形式。 第66页，共102页，编辑于2022年，星期日 一、原核生物的基因重组 （一）转化（transformation） 1. 定义： 受体菌直接吸收供体菌的DNA片段而获得后者部分遗传性状的现象。形成的杂种后代称为转化子。 2. 能进行转化的微生物种类 Streptococcus pneumoniae ；Bacillus ；Rhizobium ；Pseudomonas； Staphylococcus； Saccharomyces cerevisiae； Neurospora crassa； Aspergillus niger等。但肠道菌科的细菌如E.coli等很难进行转化。 第67页，共102页，编辑于2022年，星期日 3.影响菌株间发生转化的因素 与它们在进化过程中的亲缘关系有关； 最易与细胞表面结合的是dsDNA； 发生转化的细胞必须处于感受态; 转化的频率低（0.1-1%，最高为20%）; 转化需要的DNA浓度极低; 4.感受态（competence） 指受体细胞最易接受外源DNA片段并能实现转化的一种生理状态。 不同菌种感受态细胞所占比例、出现的时间和维持时间不同 外界环境因子如环腺苷酸（cAMP）和Ca2+等可提高受体细胞的感受态水平。 调节感受态的是一类特异蛋白—感受态因子 第68页，共102页，编辑于2022年，星期日 dsDNA 供体（strR） 感受态受体（strS） 同源区段配对 单链整合，形成一小段杂合DNA区段 转化子（strR） 非转化子（strS） 复制与分离 5.转化过程 第69页，共102页，编辑于2022年，星期日 6.转染 (transfection) 用提纯的病毒核酸（DNA或RNA）去感染其宿主细胞，可增殖出一群正常病毒后代的现象称为转染。 第70页，共102页，编辑于2022年，星期日 1.定义 通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介，把供体细胞的小片段DNA携带到受体细胞中，通过交换与整合，使后者获得前者部分遗传性状的现象。获得的重组细胞称为转导子。 2.转导的种类 普遍转导 局限转导 （二）转导 (transduction) 第71页，共102页，编辑于2022年，星期日 通过极少数完全缺陷噬菌体对供体菌基因组上任何DNA小片段的“误包”，而将其遗传性状传递给受体菌的现象； 一般用温和噬菌体作为普遍转导的媒介； 可分为完全普遍转导和流产普遍转导； 普遍转导 (generalized transduction) 第72页，共102页，编辑于2022年，星期日 完全普遍转导( generalized transduction) 供体 受体 第73页，共102页，编辑于2022年，星期日 1.变量试验（fluctuation test） 实验设计者 美国的鲁里亚和德尔波留克根据统计学原理设计； 时间：1943年 实验材料： 对T1噬菌体敏感的大肠杆菌 实验目的 验证突变的性状与引起突变的原因间有无直接对应关系 实验过程 第30页，共102页，编辑于2022年，星期日 103