慢性乙型肝炎患者疾病严重程度与滤泡辅助性T淋巴细胞免疫球蛋白水平的相关性研究.docVIP

慢性乙型肝炎患者疾病严重程度与滤泡辅助性T淋巴细胞免疫球蛋白水平的相关性研究 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：慢性乙型肝炎患者疾病严重程度与滤泡辅助性T淋巴细胞免疫球蛋白水平的相关性研究 1 1、资料与方法 2 2、结果 4 3、讨论 5 4、结论 6 文2：滤泡辅助性T细胞与免疫性疾病的关系研究 7 1 Tfh 细胞的分化 7 2 Tfh 细胞与其他 Th 细胞亚群之间的相互联系 9 3 Tfh 细胞与临床疾病 10 4 问题与展望 13 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 15 文章致谢（模板） 16 正文 慢性乙型肝炎患者疾病严重程度与滤泡辅助性T淋巴细胞免疫球蛋白水平的相关性研究 文1：慢性乙型肝炎患者疾病严重程度与滤泡辅助性T淋巴细胞免疫球蛋白水平的相关性研究 慢性乙型肝炎是一种常见的传染性疾病，指乙型肝炎病毒（HBV）检测阳性，病程超过6个月或发病时间不明确但有相关症状出现的疾病[1]。临床主要表现为恶心、厌食、腹胀和乏力等。近年来慢性乙型肝炎在全球有不断流行趋势，据统计，我国慢性乙型肝炎患者已高达亿[2]。由于该病难以治愈，且发展到后期能够导致肝硬化、肝癌等相关疾病的发生，对人们生命健康造成严重威胁。因此，及早诊断、及时治疗意义重大。尽管目前对慢性乙型肝炎的发病机制尚不清楚，但学术界普遍认为该病与HBV感染后肝细胞损伤、免疫应答紊乱关系密切[3]。滤泡辅助性T淋巴细胞（Tfh）是由brEITFELD等[4]在扁桃体中发现的一种新型CD4+T淋巴细胞亚群，有研究发现HBV感染者外周血Tfh不同程度升高，推测Tfh可能参与了HBV感染后的相关免疫反应[5]。免疫球蛋白（Ig）是免疫活性分子中的一类，当有病毒入侵时，机体产生免疫反应，导致Ig水平升高。目前，Tfh和Ig水平与乙型肝炎严重程度的相关性研究仍较少，因此，本研究通过检测乙型肝炎患者Tfh和Ig水平，探讨其与疾病严重程度的相关性，现报道如下。 1、资料与方法 一般资料 选取2016年3月至2018年10月本院收治的112例慢性乙型肝炎患者为研究对象，根据病情严重程度分为慢性非重型乙型肝炎组（69例）和慢性重型乙型肝炎组（43例）。以起病时临床表现同亚急性重型肝炎，血清总胆红素（TBIL)10倍正常值，凝血酶原活动度低于40%判断为慢性重型乙型肝炎。另选取同期本院70例健康体检者作为对照组。3组研究对象性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P），具有可比性，见表1。本研究经本院伦理委员会批准执行。纳入标准：（1）符合中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会制定的《慢性乙型肝炎防治指南（2015年版）》[6]中的诊断标准；（2）年龄18～65岁；（3)Child-Pugh评分为A级；（4）自愿参与本研究，并签署知情同意书。排除标准：（1）合并恶性肿瘤者；（2）伴有抑郁、精神疾病史者；（3）合并其他类型肝炎病毒感染者；（4）合并肾、心、肺功能异常者；（5）近期接受过免疫调节剂或抗菌药物治疗者；（6）孕妇或妊娠期女性。 方法 本文中Tfh通过检测CD4+CXCR5+T淋巴细胞比例来反映。于清晨空腹状态下采集研究对象静脉血1mL，置于含有肝素锂的试管中。取100μL，依次加入5μL荧光抗体PerCP-anti-CD4-PerCP（美国BD公司）和5μLFITC-anti-CXCR5（美国BD公司），避光染色30min，随后加入红细胞裂解液（按1∶10的比例），混匀后避光10min，3000min离心5min，弃上清液。加入2mL磷酸盐缓冲液（PBS）重悬，1000min离心1min，弃上清液，加入200μLPBS重悬细胞后采用EPICSXL型流式细胞仪（美国Coulter公司）检测外周血Tfh（检测项目为CD4+CXCR5+T淋巴细胞比例）水平，所有试剂购自美国Beckman公司，严格按照说明书要求操作。 表13组研究对象一般资料比较 于清晨空腹状态下抽取研究对象肘静脉血2mL，3000min离心10min，分离血浆后-80℃保存，采用免疫比浊法测定IgA、IgG和IgM水平。试剂盒由美国Beckman公司提供，严格按照说明书要求操作。 于清晨空腹状态下抽取研究对象静脉血6mL，取4mL1500min离心15min，取上清液置于-80℃下保存。采用LX20全自动生化分析仪（美国Beckman公司）测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）和TBIL水平，采用双缩脲法测定血清总蛋白（TP）水平。将2mL静脉血加入含有枸橼酸钠的抗凝管中，3000min离心10min，采用ACL7000全自动血凝仪（美国Beckman公司）测定凝血酶原时间（PT），