4种鳕鱼多重PCR检测方法建立.docx

摘要：为了建立可对鳕鱼DNA进行特异性检测的PCR方法，从GenBank数据库下载太平洋鳕、大西洋鳕、狭鳕、绿青鳕4种鳕鱼的突触素样蛋白（pantophysin Pan I）基因序列，并用Bioedit 7.0软件对上述不同鳕鱼的该基因碱基序列进行比较。根据引物设计的基本原则，选择了鳕鱼与其他鱼类碱基序列上差异位点较多片段，设计出太平洋鳕、大西洋鳕、狭鳕、绿青鳕PCR特异性引物。用该引物分别对从7种鳕鱼和14种非鳕鱼鱼类的肌肉、脏器组织中提取的DNA进行PCR扩增。实验将所设计的引物通过两种引物组合、三种引物组合以及四种引物组合，进行多重PCR试验，结果表明，大西洋鳕、绿青鳕、太平洋鳕和狭鳕四