果蔬中还原糖含量的测定.pdfVIP

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果蔬中还原糖含量的测定 果蔬中可溶性糖可分为还原糖 (包括各种单糖和麦芽糖)和非还原糖 (主要 是蔗糖)。还原糖具有醛基和酮基,主要来源于多糖类物质和其它一些大分子的 降解产物。同时,这些还原糖还能为淀粉、纤维素、果胶质等大分子碳水化他合 物和核苷酸等多种物质的合成提供糖基供体,与果蔬的生理生化代谢密切相关。 在测定果蔬组织中的多种碳水化合物如总糖、淀粉、纤维素,多种酶如淀粉 酶、纤维素酶、果胶酶和葡聚糖酶、糖苷酶时,都需要通过测定还原糖含量的方 法测定这些物质含量或酶的活性。因此,还原糖含量测定方法在研究果蔬生理生 测 化代谢中具有重要意义。常用的测定果蔬中还原糖的化学方法有3,5-二硝基水杨 酸法、斐林氏法、碘量法、高锰酸钾法、铁氰化钾法等。 检 质 I .3,5-二硝基水杨酸法 一、目的要求 液 3,5- 熟练掌握 二硝基水杨酸法测定果蔬组织中还原糖的原理和方法。 二、基本原理 测 3,5- 3- -5- 海二硝基水杨酸溶液与还原糖溶液共热后被还原成棕红色的 氨基 硝 基水杨酸化合物。在一定范围内,还原糖的量和棕红色的颜色深浅的程度成一定 比例关系。因此,可在540 nm 波长下通过测定棕红色物质的吸光度值计算样品 上 检 中还原糖的含量。 质 液 测 海 检 三、材料、仪器及试剂 上 (一)材料 各种果蔬组织。 质 (二)仪器设备 25 mL 1 电子天平、分光光度计、刻度试管 ( )、漏斗、滤纸、研钵、烧杯 ( 000 mL 100 mL 1 000 mL 100 mL 液 、 )、三角瓶、容量瓶 ( 、 )、刻度吸管 (或移液 器)、水浴锅。 (三)试剂 海 1.1 mg/mL 葡萄糖标准液 100 mg 80 准确称取 分析纯葡萄糖 (预先在 ℃烘至恒重),置于小烧杯中, 上 用少量蒸馏水溶解后,转移到100 mL 的容量瓶中,以蒸馏水定容至刻度,摇匀, 冰箱中保存备用。 2 3,5- DNP . 二硝基水杨酸试剂 ( ) 1 500 mL 185 g ()配制 含有 酒石酸钾钠的热水溶液;

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