过氧化氢酶活性测定.pdfVIP

下载本文档

31
0
约4.85千字
约 2页
2022-12-13 发布于上海
举报
版权申诉

过氧化氢酶活性测定.pdf

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

过氧化氢酶活性测定一、目的要求学习果蔬组织中过氧化氢酶活性的测定原理和方法。二、基本原理过氧化氢酶（Catalase,CAT）属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化植物体内积累的过氧化氢（H O ）分解为水和分子氧，从而减少H O 对果蔬组织可能造成的氧化伤害。 2 2 测 2 2 在CAT催化H O 分解为水和分子氧的过程中，该酶起电子传递作用，而过 2 2 氧化氢既是氧化剂又是还原剂。检酶 2H O →2H O+ O 质 2 2 2 2 因此，可根据反应过程中过氧化氢的消耗量来测定该酶的活性。过氧化氢在波长240nm 处除具有吸收峰，利用紫外分光光度计可以检测过氧化氢含量的变化。液三、材料、仪器及试剂（一）材料测海苹果、梨、番茄等。上（二）仪器及用具检研钵、高速冷冻离心机、紫外分光光度计、计时器、移液器、离心管、容量瓶（100mL、1000mL）。（三）试剂质 1．100mmol/L、pH 7.5磷酸缓冲液母液A （200mmol/LNa HPO 溶液）：称取35.61gNa HPO ·2H O 或53.65g 2 4 2 4 2 液 Na HPO ·7H O 或71.64 gNa HPO ·12H O，用蒸馏水溶解，定容至1000mL。 2 4 2 2 4 2 母液B （200 mmol/LNaH PO 溶液）：称取27.6 g NaH PO ·H O 或31.2 g 2 4 2 4 2 测 NaH PO ·2H O 用蒸馏水溶解，定容至1000mL。 2 4 2 海取84.0mL 母液A 和16.0mL 母液B 混合后，调节pH 至7.5，然后稀释至 200mL。上检 2．提取缓冲液（含5mmol/LDTT 和5%PVP）称取77mgDTT，5gPVP，用100mmol/L、pH 7.5磷酸缓冲液溶解，定容至100mL，即得提取缓冲液，低温（4℃）贮藏备用。质 2．20mmol/LH O 2 2 吸取227 µL 的30%H O ，用50mmol/L、pH 7.5 的磷酸缓冲液稀释至100mL， 2 2 液现用现配，低温避光保存。四、实验步骤海（一）酶液制备称取