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《临床免疫学检验技术》课程实验教学大纲 课程代码 课程名称：临床免疫学检验技术 适用专业：医学检验技术 课程类别：必修 开课学期：第六学期 实验学时： 44 学 分：5 一、开课实验室 医学影像与检验实验室 二、课程性质与任务 课程性质：《临床免疫学检验技术》是应用免疫学理论与技术研究疾病的发生机制、免疫学诊断、治疗和预防的学科，是医学检验技术专业的一门主干课和专业课。 课程任务：通过学习使学生具有扎实的基础理论和临床实践技能，为以后从事科研工作及临床检验工作并对临床检验结果的正确分析打下坚实基础，使学生具有一定的的临床应用思维分析能力和对疾病的诊断及防治能力，同时培养学生具有较强的动手能力和一定的科研能力。 三、教学目的和要求 1.掌握常用免疫学技术和免疫检验方法的原理、操作、结果判定、质量控制及方法学评价。 2.熟悉临床应用思维分析能力和对疾病的诊断及防治能力， 3.提高学生具有较强的动手能力和一定的科研能力，解决临床免疫检验相关实际问题。 四、考核形式要求 实验成绩100分记，实验考核占总成绩20%。 五、实验项目名称与学时分配 序号 实验项目名称 实验类型 实验学时 每组人 数 实验要求 （必做或选做） 1 免疫原和抗血清的制备 综合 10 12 必做 2 凝集试验 验证 4 12 必做 3 沉淀试验 验证 4 12 必做 4 酶联免疫吸附试验 验证 4 12 必做 5 化学发光免疫分析 验证 4 12 必做 6 固相膜免疫测定 验证 4 12 必做 7 免疫细胞分离 验证 4 12 必做 8 免疫细胞功能检测 验证 2 12 必做 9 补体检测 设计 4 12 必做 10 实验考核 综合 4 12 必做 六、实验项目的具体内容 实验一 免疫原和抗血清制备 1、实验目的和要求 （1）掌握免疫血清制备的原理和方法 （2）熟悉颗粒性抗原和可溶性抗原的抗血清制备方法 2、实验原理 应用颗粒性抗原如致病菌、非致病菌、红细胞等或可溶性抗原如人全血清等反复多次注射到动物体内，使之产生免疫应答，在体内产生高效价的特异性抗体，然后采集经免疫动物的血液制备血清，此即含有特异性抗体的免疫血清，可用于血清学诊断和病原体鉴定。本实验以细菌菌体抗原及人全血清的免疫血清制备为例，说明免疫血清制备的过程。 3、材料试剂 2-3公斤家兔、伤寒杆菌标准菌株、人全血清、0.4%甲醛生理盐水、消毒用 碘酒、酒精、无菌棉签、无菌注射器、试管、研钵等 4、实验步骤 （1）领取2-3公斤左右健康雄兔，测体温、呼吸、心跳三天 （2）抗原制备 伤寒杆菌○-Ag制备、伤寒杆菌H-Ag制备、人全血清抗原制备 （3）免疫方案 颗粒性抗原抗血清制备(○-Ag或H-Ag) 可溶性抗原抗血清制备 （4）放血 心脏取血 （5）保存 离心血清，4℃保存备用。 5、教学方式 老师讲解、示教 + 学生互相操作，老师指导 6、考核要求 随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。 7、实验报告要求 要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。 实验二 凝集试验 1、实验目的和要求 （1）掌握玻片凝集试验（定性）的原理、操作方法及医学意义。 （2）掌握试管凝集试验（半定量）的原理、操作方法及医学意义。 （3）掌握胶乳凝集试验的方法及应用。 2、实验原理 颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下发生反应，出现肉眼可见的凝集小块，称为直接凝集反应。 类风湿因子（RF）是一种抗变性IgG的抗体。聚苯乙烯胶乳颗粒具有很强的吸附蛋白质的能力，借此将抗原（IgG）与胶乳颗粒结合成致敏颗粒，直接与待测标本中的抗体（RF）发生凝集反应。 3、材料试剂 诊断血清、生理盐水、待检细菌的平板培养物、待检血清、伤寒杆菌“O”和“H” 抗原悬液、类风湿因子检测试剂、载玻片、接种环、恒温水浴箱、试管架、试管、吸管。 4、实验内容 玻片凝集试验（定性）： 试管凝集试验（半定量）： 胶乳凝集试验： 5、教学方式 老师讲解、示教 + 学生互相操作，老师指导 6、考核要求 随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。 7、实验报告要求 要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。 实验三 沉淀实验 1、实验目的和要求 （1）掌握琼脂扩散实验的原理、操作方法及医学意义。 （2）单扩试验中Mancini曲线和Fehcy曲线的绘制，计算标本含量。 2、实验原理 可溶性抗原与相应抗体分别放入凝胶内进行扩散，二者在比例合适的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。 3、材料试剂 羊抗人IgG诊断血清（2国际单位/ ml）、人免疫球蛋白工作标准（IgG含量11.66mg/m