生物化学参考DNA的复制，修复和重组 2.pptxVIP

DNA的复制，修复和重组 DNA Replication，Repair，and Recombination宋潇达2014.12 1日程表：12月12日： DNA的复制与修复-2 生化讨论-1 （动态生化部分）12月19日： 转录与基因表达调控12月22日： 蛋白质的生物合成-112月26日： 蛋白质的生物合成-2 01月02日： 生化讨论-2 （分子生物学部分）01月05日： 生化讨论-3 （静态生化部分）01月09日： 复习答疑01月10日： 上午考试 目录Section 1. 引言Section 2. 本章背景Section 3. 基于DNA的DNA复制Section 4. DNA的损伤及修复Section 5. 基于RNA的DNA的复制Section 6. DNA的重组Section 7.突变及单核苷酸多态性Section 8.DNA相关的生物技术2 3Section 5. 基于RNA的DNA的复制逆转录的发现：实验现象：A.1964年，Temin等首次发现：DNA合成抑制剂可以遏制鸟类肉瘤病毒ASV等RNA肿瘤病毒所造成的感染。B. ASV子代病毒颗粒的产生被放线菌素D所抑制PS: 放线菌素D嵌入DNA双螺旋的小沟中，与DNA形成复合体，阻碍RNA多聚酶的功能，抑制RNA的合成。表明在RNA肿瘤病毒的RNA复制过程中需要合成DNA。说明转录对于RNA肿瘤病毒增殖可能是必须的。 4假想：DNA是RNA肿瘤病毒在复制和致癌过程中的中间物这一过程大致为：RNA肿瘤病毒－DNA原病毒－RNA肿瘤病毒。逆转录（reverse transcription）： 是指在逆转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程。所有的RNA肿瘤病毒都是逆转录病毒，并不是所有的逆转录病毒都致癌。HIV 5逆转录酶（reverse transcriptase）定义：RNA指导的DNA聚合酶。具有三种酶活性，即RNA指导的DNA聚合酶、DNA指导的DNA聚合酶和RNase H的活性。合成DNA的方向：逆转录酶合成DNA的方向为5’－3’合成DNA的引物：1. 不能从头合成DNA。引物为逆转录病毒包装时从宿主细胞获得的tRNA分子。2. 一些鸟类逆转录病毒以宿主tRNATrp为引物，而鼠类逆转录病毒则以宿主细胞tRNAPro为引物。3. RNase H活性：是指逆转录酶可以从5’－3’和3’－5’两个方向水解DNA-RNA杂合分子中的RNA。 6Section 6. DNA的重组DNA重组（DNA recombination）指DNA分子内或分子间发生的遗传信息的重新共价组合过程。包括同源重组、特异位点重组和转座重组等类型，广泛存在于各类生物。 7Section 7.突变及单核苷酸多态性点突变，缺失和插入，重排单核苷酸多态性：主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。药物基因组学定义为在基因组学的基础上，通过将基因表达或单核苷酸的多态性与药物的疗效或毒性联系起来，研究药物如何由于遗传变异而产生不同的作用 8Section 8. DNA相关的生物技术聚合酶链式反应 PCR 9DNA电泳 Gel Electrophoresis 10限制性内切酶分析 restriction fragment analysis 11Southern Blotting of DNA Fragments 12Dideoxy Chain Termination Method for Sequencing DNA 13 14RT-PCR Analysis of the Expression of Single Genes 15DNA Microarray Assay of Gene Expression Levels 谢谢大家!16