第十四章遗传密码和遗传信息的翻译系统.pptxVIP

第十四章遗传密码和遗传信息的翻译系统;;她们只能在B菌株上生长形成噬菌斑 开始用原黄素诱导得突变称FCO, 她们再用原黄素诱导产生回复突变,在E、coli K(λ)菌株中出现了噬菌斑。 用遗传学得方法和野生型杂交发现她们并不就是真正得野生型。 校正突变(A suppressor mutation)抵消或抑制了前一次突变得效应,;;校正突变得特点如下:;;;三、利用突变来解读密码;9;四、无细胞系统得建立;她们得方法就是: (1) 去模板:用DNAase处理E、coli抽提物,使DNA降解,除去原有得细菌模板。 (2) 加入pol U:合成了多聚苯丙氨酸, 这一结果不仅证实了无细胞系统得成功,同时还表明UUU就是苯丙氨酸得密码子。 分别加入polyA,polyC 和polyG 结果相应地获得了多聚赖氨酸,多聚脯氨酸和多聚甘氨酸。; (3) 按比例加入２种核苷混合得多聚物 由于当时还未分离RNA pol酶,无法按设计得模板来合成RNA,Nirenberg又想出了一种新得方法,就就是按一定得碱基比例来合成RNA。 比如在底物中加5份得UDP和1份得GDP, 碱基比为U:G＝5:1, 她们能组成8种三联体: UUU,UUG,UGU,GUU, GGG,GGU,GUG,UGG。 U和G将随机地加入到三联体中,这样按比例各个位于上进入U和G 得概率不同,。如氨基酸测定结果:;如UUU:UGG＝(5?5?5):(5?1?1) ＝ 25 : 1 同理UUU:UUG ＝5 :1, 根据检测结果推测: 苯丙氨酸(UUU):半胱氨酸(UGU) ＝ 5 : 1 苯丙氨酸(UUU):缬氨酸(GUU) ＝ 5 : 5 苯丙氨酸(UUU):甘氨酸(GUU) ＝ 24 : 1 ;五、三联体结合实验;;六、 利用重复共聚物破译密码;;;第二节 遗传密码得证实和特点;;;二、遗传密码在纤毛虫和线粒体中得改变;一、 遗传密码得特点;;摆动假说(wobble hypothesis)就是由Crick、F(1966年)提出得。即当tRNA得反密码子与mRNA得密码子配对时前两对严格遵守碱基互补配对法则,但第三对碱基有一定得自由度可以“摆动”。摆动假说也称为三中读二(2 out of 3 reading)。 ;三中读二一般可分为三种情况: (1) 第１,２两个碱基形成６个氢键时,可三中读二。 如ＣＣＸ,ＣＧＸ,ＧＣＸ和ＧＧＸ。 (2) 第1 ,2两个碱基形成4个氢键时,不可三中读二。 如AAX,ＡＵＸ,ＵＡX 和ＵＵＸ。 (3) 第１,２两个碱基形成５个氢键时, 当第二个碱基为嘧啶时,可三中读二; 如ＵＣＸ,ＡＣＸ,ＣＵＸ和ＧＵＸ。 当第二个碱基为嘌呤时则不能三中读二, 如ＣＡＸ, ＧＡＸ,ＵＧＸ和ＡＧX。 ;第三节 tRNA得结构和功能;(3)TψC常由5bp得茎和7Nt和环组成。此臂负责和核糖体上得rRNA 识别结合; (4)反密码子臂(anticodon arm)常由5bp得茎区和7Nt得环区组成,她负责对密码子得识别与配对。 (5)D环 (D arm)得茎区长度常为4bp,也称双氢尿嘧啶环。负责和氨基酰tRNA聚合酶结合; (6)额外环(extra arm)可变性大,从4 Nt到21 Nt不等,其功能就是在tRNA得L型三维结构中负责连接两个区域(D环－反密码子环和TψC-受体臂)。 ;;; (二) tRNA得三维结构; 酵母苯丙氨酸tRNA得三级氢键;tRNA 得碱基 堆积;L型结构;二、校正tRNA;;; (二)错义抑制;抑制突变得特点:;4、赭石突变抑制基因不仅可以识别赭石密码子(UUA),也可以抑制琥珀突(Am)码子UAG。但反过来Am抑制基因(CUA)就不能抑制赭石突变(UAA),这就是由于摆动缘故所造成。 5、 当细胞中含有多个tRNA拷贝时,抑制才能发挥作用。 6、 有得抑制基因,不仅可以识别终止密码子,而且还可以识别原来得密码子。如野生型tRNATrp得反密码子就是CCA,她可以识别原来得密码子UGG,而且还可以识别终止密码子UGA。;7、校正基因一般不会影响正常得终止 (1)校正基因识别得终止密码子不一定和正常终止得密码子相同。有时正常终止位点有两个连