NY_T 537-2023 猪传染性胸膜肺炎诊断技术.docxVIP

NY/T?５３７—２０２３ 猪传染性胸膜肺炎诊断技术 １　范围 P本文件规定了猪传染性胸膜肺炎?临?床?诊?断、样?品?采?集?和?运?送、病?原?分?离?与?鉴?定、CR?检?测、实?时?荧?光 P PCR?检测、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验的技术要求和规范. 本文件适用于猪传染性胸膜肺炎的诊断、检疫、检测、监测和流行病学调查等. ２　规范性引用文件 下?列?文?件?中?的?内?容?通?过?文?中?的?规?范?性?引?用?而?构?成?本?文?件?必?不?可?少?的?条?款?.?其?中?,注?日?期?的?引?用?文 件?,仅?该?日?期?对?应?的?版?本?适?用?于?本?文?件?;不?注?日?期?的?引?用?文?件?,其?最?新?版?本(包?括?所?有?的?修?改?单?)适?用?于 本文件?. NY/T５４１　兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 ３　术语和定义 下列术语和定义适用于本文件. ３??１ e?t卫星现象　Sat e?t 挑取?APP?菌落接种于血琼脂表面,用金黄色葡萄球菌点种或垂直划线,在３７?℃?５％~１０％?CO２条件 下培养２４h~４８h.越靠近金黄色葡萄球菌菌落生长的本菌菌落越大,越远的越小甚至不见菌落生长,即 所谓“卫星现象”,也称?V?因子需要试验. ３??２ iβ溶血　βhemolyss i 菌落周围形成完全透明的溶血环,红细胞完全溶?解,称?为?β溶?血.相?对?的,在?菌?落?周?围?形?成?不?透?明?的 草绿色溶血环,红细胞未溶解,血红蛋白变成绿色,称为α溶血. ３??３　 ii A胸膜肺炎放线杆菌含重复子毒素　Actnobacluspleuropneumoniae　RTX ii A rAPP可产生４种毒素,分别为?ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ、ApxⅣ,均为重要的毒力因子,具有细胞毒性或 r 溶血性,是一种穿孔毒素,属于含重复子毒素(epeatsintoxin,RTX)家族.其中,ApxⅣ?存在于所有血清 型,且只在猪体内产生. ４　缩略语 下列缩略语适用于本文件. AiiP Ｇ iiAPP: Aii P Ｇ i i PBS:磷酸盐缓冲液(hosphatebuferedsalnebufer) TSB:胰蛋白大豆肉汤(Tryptcasesoybroth) c?i l???ii?iＧ ＧNAD:烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 c?i l???i i?iＧ Ｇ CAMP:协同溶血试验(ChrstsAtkinsMunchＧpeterson) AtP i ii At P i i i li i PCR:聚合酶链式反应(olymerasechanreacton) DNA:脱氧核糖核酸(Deoxyrbonucecacd) i l???i idNTP: i l???i i iＧ iＧTE:TrsEDTA?缓冲液 iＧ iＧ  １ NY/T?５３７—２０２３ iＧ iＧTAE:TAE?缓冲液(Trs iＧ iＧ iELISA:酶联免疫吸附试验(Enzymelnkedimmunesorbentassay) i HRP:辣根过氧化物酶(Horseradihperoxidase) ３３?５５Ｇ ３３?５５Ｇ iTMB:,′,,′ ３３?５５Ｇ ３３?５５Ｇ i I Ｇ Ｇ??tIPTG:异丙基ＧβＧDＧ硫代半乳糖苷 I Ｇ Ｇ??t ５　临床诊断 ５??１　流行病学 ５??１??１　易感动物 对猪具有高度宿主特异性,各年龄猪均易感. ５??１??２　传染源 带菌猪、病猪及其分泌物是本病?的?传?染?源.?病?菌?主?要?存?在?于?肺?脏?病?变?部?位、扁?桃?体、支?气?管、鼻?分?泌 物中. ５??１??３　传播途径 主要传播途径是通过猪与猪的直接接触或短距离飞沫传播. ５??１??４　流行特点 一年四季均可发生,秋末春初季节变化时多发.饲养环境突然改变、密集饲养、通风不良、气候突变及 长途运输等诱因可引起本病.猪场或猪群之间的传播,多由引进或混入?带?菌?猪、慢?性?感?染?猪?所?致,集?约?化 猪场往往呈跳跃式急性暴发,死亡率高. ５??２　临床症状 ５??２??１　最急性型 本病临床症状因动物的年龄、免疫状态、疫病状态、环境因素及对病原的易感程度等不同而呈现差异. 猪群中一头或几头猪只突然发病.体温升高达４１?℃?~４２?℃,并?可?出?现?短?期?呕?吐.鼻、耳、眼?及?后?躯?皮?肤 常发绀,最后阶段出现严重呼吸困难,临死前常从口、鼻流出血性泡沫状?分?泌?物.有?时?未?见?任?何?症?状?即?突 然死亡. ５??２??２　急性型 病猪体温升高,可达４０??５?℃~４１?℃,精神委顿,喜卧少动,饮食不振.有咳嗽、喘气、呼吸困难等严重 呼吸道症状. ５??２??３　亚急性型或慢性型 病猪体温可能无