DB22T 2964-2019饲料中壬基酚的测定 液相色谱-质谱质谱法.docxVIP

ICS 65.120 B 46 吉 林 省 地 DB22 方 标 准 DB 22/T 2964—2019 饲料中壬基酚的测定 液相色谱-质谱/质谱 法 Determination of Nonyl Phenol in feeds—LC-MS/MS method 2019 - 05 - 27 发布 2019 - 06 - 17 实施 吉林省市场监督管理厅 发 布 I DB22/T 2964—2019 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2015给出的规则起草。 本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。 本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心、白城海关、吉林大学。 本标准主要起草人：王岸英、胡婷婷、冯博、李玲、宋翱、刘洋、李嘉慧、李爱军。 1 DB22/T 2964—2019 饲料中壬基酚的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本标准规定了饲料中壬基酚的液相色谱-质谱/质谱测定方法的原理、 试剂或材料、 仪器设备、样品、 试验步骤、试验数据处理、精密度及试验报告。 本标准适用于配合饲料、预混合饲料及浓缩饲料中壬基酚的测定。 本方法饲料中壬基酚的检出限为50.0 g/kg，定量限为150.0 g/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样中的壬基酚用乙腈提取，饱和乙酸铅溶液除蛋白，经PSA(N-丙基乙二胺)固相萃取柱净化， 液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。 4 试剂或材料 除另有规定，仅用分析纯试剂。 4.1 水：GB/T 6682，一级。 4.2 壬基酚标准物质：Nonyl Phenol，C15H24O，CAS 号：25154-52-3。 4.3 三水合乙酸铅(C4H6O4Pb ? 3H2O)。 4.4 甲醇(CH3OH)：色谱级。 4.5 乙腈(CH3CN)：色谱级。 4.6 丙酮(CH3COCH3 )：色谱级。 4.7 正己烷(C6H14 )：色谱级。 4.8 甲酸(HCOOH)：优级纯。 4.9 饱和乙酸铅溶液：在 50 mL 水中加入一定量的三水合乙酸铅(4.3)，超声 5 min，直至固体不再 溶解。 4.10 3%甲酸-甲醇溶液：量取 3 mL 甲酸(4.8)和 97 mL 甲醇(4.4) ，混匀备用。 4.11 35%乙腈溶液：量取 65 mL 水(4.1) 和 35 mL 乙腈(4.5)， 混匀备用。 4.12 标准储备溶液：准确称取壬基酚标准物质 100 mg(精确到 0.1 mg)，用甲醇(4.4)溶解并定容 于 100 mL 棕色容量瓶中，配制成浓度为 1 000 μg/mL 的标准储备液， -18 ℃条件下保存 6 个月。 4.13 空白样品提取液：用不含壬基酚的样品，参照 7.1 制备空白样品提取液。 4.14 标准工作液： 根据需要将壬基酚标准储备溶液用空白样品提取液(4.13) 稀释成适用浓度的标准 工作溶液。该溶液在 0℃~4 ℃冰箱中保存。 2 DB22/T 2964—2019 4.15 PSA 固相萃取柱：即 N-丙基乙二胺固相萃取柱，500 mg/6 mL 或相当者。使用前依次用 5 mL 丙 酮(4.6)、5 mL 正己烷(4.7)活化。 4.16 滤膜：0.22 μm，有机系。 5 仪器设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪： 配备电喷雾离子源(ESI)。 5.2 天平：感量为 0.01 g 和 0.0 001 g。 5.3 样品粉碎机。 5.4 高速离心机：10 000 r/min。 5.5 超声波清洗机。 5.6 涡旋混合器。 5.7 旋转蒸发仪。 6 样品 6.1 按 GB/T 14699.1 的规定抽取有代表性的样品，用四分法缩减取样。 6.2 按照 GB/T 20195 的规定制备样品，粉碎过 0.45 mm 孔径筛，混合均匀，装入磨口瓶中备用。 7 试验步骤 7.1 提取 称取5 g(精确至0.01g) 饲料样品于50 mL具塞离心管中，加入20 mL乙腈(4.5)，充分涡旋混合1 min，超声提取10 min，于10 000 r/min速率下离心5 min，收集上清液于鸡心瓶中；残渣中再加入20 mL 乙腈(4.5) 重复提取1次，合并两次提取液，于35℃下旋转蒸发至近干后，加入3 mL正己烷(4.7)涡 旋溶解，