北中大中药化学课件第13章 中药化学成分结构鉴定技术与方法.pptxVIP

第十三章 中药化学成分结构鉴定技术与方法;本章主要内容;第一节 概述 ;对于可能为已知结构的化合物，可采用与该已知物共熔（沸）点、共色谱和共红外（IR）等方法进行鉴定。 未知结构的结构测定方法通常包括:化学方法（如化学降解、衍生物合成、酶法等）、波谱法（红外光谱、紫外可见光谱、核磁共振光谱、质谱、旋光光谱法和圆二色光谱法、X射线衍射法）。;一 物理常数的测定 二 纯度测定 三 化合物的结构骨架与官能团的确定 ; 物理常数的测定包括熔点、沸点、比旋度、折光率和比重等。另外，比旋度、折光率和相对密度等物理常数也是液体化合物的重要参数。 固体物质—熔点，熔距应在0.5~1.0℃的范围内。 液体物质—应有恒定的沸点，除高沸点物质外，沸程一般不应超过5℃。 ; 运用色谱方法如薄层色谱法（TLC）、纸色谱（PC）、气相色谱（GC）、高效液相色谱（HPLC），在两种以上不同的溶剂系统或色谱条件 下进行测定，分析其纯度。 一般测定的化合物用两种以上不同的色谱条件测定，显示单一斑点或色谱峰，固体样品的熔距为0.5 ~1.0℃，液体样品的沸程在5℃以内，即可认为该化合物的纯度较高，可用于化合物的鉴定和结构测定。 ;利用化学方法推定分子结构骨架与官能团的确定主要依靠特征性呈色反应。利用呈色反应进行检识，应避免出现假阳性结果。 经典的化学法结构研究中，常采用化学方法将分子降解为几个稳定的、易于鉴别的、可通过合成证明的简单碎片，然后按照降解原理合理推导出降解前可能的结构。 波谱技术的进步与成熟使其逐渐成为结构研究的主要手段。;第三节 波谱分析进行结构研究的技术与方法 ;原理：指有机化合物吸收紫外光（200～400nm）或可见光（400~800nm）后，发生电子跃迁而形成的吸收光谱。 用途：用于判断分子内的共轭系统情况。对于共轭 链较长的有机分子比如苯丙素类、（蒽）醌类和黄酮类化合物等，UV光谱有一定的价值。 ;二 红外光谱;有机化合物分子在外加磁场中受到一定的频率的电磁波的照射后，有磁矩的原子核吸收一定的能量而产生能级的跃迁而发生核磁共振，以吸收峰的频率对吸收强度作图获得NMR谱。 常用到的有一维NMR谱、二维NMR谱 ;核磁共振氢谱（1H-NMR） 在氢同位素中，1H的丰度比最大，信号灵敏度也高，故1H-NMR的测定比较容易，应用得最广泛。 正常1H-NMR谱技术能提供的结构信息参数，主要是化学位移（δ）、峰形与偶合常数（J）及峰面积。 ;1H-NMR谱的化学位移（δ）范围为0~20 ppm，可反映氢信号周围的化学环境。 例如烷基氢与sp3杂化碳原子相连，其β碳原子也是sp3杂化时，烷基氢化学位移在δ0.90~1.50处；烯氢的化学位移在δ4.50~8.00；炔氢的化学位移在烷基氢与烯基氢之间；芳香氢化学位移在δ6.50~8.00之间。 ; 例：仙茅苷（curculigoside A）的1H-NMR谱中，δ6.63~7.40之间的峰是芳氢信号，δ3.00~4.00是与氧相连碳上的氢信号。 ;峰形与偶合常数（J）可反映该氢信号与附近氢的相互关系。 磁不等同的两个或两组氢核，在一定距离内因相互自旋偶合干扰使信号发生裂分，其形状有二重峰（d）、三重峰（t）、四重峰（q）、双二重峰（dd）及多重峰（m）等，裂分峰之间的距离用偶合常数（J=（δ1-δ2）×频率）表示。未受偶合干扰的氢信号表现为单峰（s）。 峰形反映该氢附近氢的数量，简单偶合系统中，峰的裂分符合“n+1规律”，即一组氢信号裂分的数目等于相邻氢的数目加一。偶合常数（J）反映相互偶合的两个氢的距离，间隔的键数越少J值越大，反之则越小。 ;例：仙茅苷的局部放大图13-3中δ 6.98（2H，d，J = 8.8Hz）裂分为二重峰，说明与之偶合的氢的数量是1；偶合常数J = 8.8 Hz说明两个氢之间是邻偶关系。同样δ 6.82（2H，d，J=2.9 Hz）也与邻位的1个氢偶合，裂分为二重峰；偶合常数J = 2.9 Hz说明两个氢之间是间偶关系。另外，δ 6.65（2H，dd，J = 8.8，2.9 Hz）这个氢与上述两个氢分别是邻偶与间偶关系，由此判断化合物中应存在1，2，4-、1，3，4-或1，2，5-三取代苯结构。;峰面积反映氢的数量。 如图，峰面积在每一峰的正下方，δ7.37下方为1.00，表明 其为1个氢信号的峰，而δ6.073处积分面积为1.81，表明其为2个氢信号的峰。 ;2. 核磁共振碳谱（13C -NMR） 13C-NMR谱的化学位移范围为δ 0~250，分辨率远高于1H-NMR。 13C-NMR能提供分子中各种不同类型及化学环境的碳核化学位移，异