十二烷基苯磺酸钠还原-维生素c的光度法测定.docxVIP

十二烷基苯磺酸钠还原-维生素c的光度法测定 维生素c具有预防和治疗坏死疾病的生理功能。这是人类维持正常生理功能，需要从食物中获得的一些微有机物质，这些物质参与身体的许多代谢和反应。维生素c广泛存在于自然界中, 主要存在于水果和蔬菜中, 蔬菜水果越新鲜, 维生素c的含量也就越高。维生素c既是一种重要的营养物质和药物, 同时也是一种用途广泛的工业原料。 目前, 维生素c的测定方法有很多, 利用维生素c使有色物质还原褪色的碘量法 1 1.1 分光光度计和酸度计 Fe (Ⅲ) (1.6g·L 724型分光光度计 (上海第三分析仪器厂) ;超级恒温槽;pHS-3C型酸度计;电子天平 (感量0.0001g) 。 1.2 实验方法 准确移取1.6g.L 2 2.1 条件选择 2.1.1 最大吸收波长a 按实验方法改变测定的波长, 测定同一份显色试液的吸光度A。实验结果表明:此溶液的最大吸收波长在521nm附近, 见图1。在本实验中, 选择测定波长为521nm。 2.1.2 hac-naac缓冲溶液+a/o 按实验方法配制一系列不同酸度的显色试液和相应空白 (以不同pH值的HAc-NaAc缓冲溶液调节酸度) , 在波长521nm处, 以试剂空白测定试液的吸光度A。由下表可知:pH在5.5-6.5时吸光度较大且稳定, 本文采用pH=6.0的HAc-NaAc缓冲溶液, 见图2。 按实验方法测定缓冲溶液的用量对吸光度的影响, 实验得知:缓冲溶液的用量为3.0mL时吸光度值最大且稳定, 见图3。 2.1.3 fe用量的影响 当铁的用量不同时, 吸光度也不同, 实验结果表明:当Fe (Ⅲ) 的用量为5.0mL时, 吸光度值最大并且稳定, 所以本文选择5.0mL的Fe (Ⅲ) 标准溶液, 见图4。 2.1.4 测定溶液的吸光度,测定溶液的吸光度,测定溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度,测定两个溶液吸光度的测定 在其它条件不变的情况下改变显色剂α, α′-联吡啶用量, 测定一系列溶液的吸光度。当α、α′-联吡啶用量在2.5-3.5mL时, 吸光度较大且稳定, 用量在3.5mL吸光度最大, 故本文选用3.5mL, 见图5。 2.1.5 加入稳定剂las 本实验考察了几种表面活性剂, 发现十二烷基苯磺酸钠对反应有增敏作用。加入稳定剂LAS, 可使电荷被中和的缔合物不析出沉淀。当稳定剂用量不同时吸光度也有所改变, 本实验十二烷基苯磺酸钠的用量在0.8mL时吸光度最大且稳定, 故本文选用0.8mL二烷基苯磺酸钠, 见图6。 2.1.6 二烷基苯磺酸钠用量对吸光度的影响 按实验方法配制溶液和相应空白, 在超级恒温槽中加热。结果发现, 温度在20-40℃时吸光度基本稳定, 且温度升高使显色反应明显加快, 超过40℃时吸光度呈降低趋势。在36℃时稳定时间最短且吸光度最大, 故本文选用36℃, 见图7。 按实验方法在加入十二烷基苯磺酸钠之前将溶液置于温度为36℃的超级恒温槽中恒温不同的时间, 再加入十二烷基苯磺酸钠试剂, 测量吸光度的变化。实验结果表明, 维生素c还原Fe (Ⅲ) -α, α′-联吡啶的反应在15min后基本完全, 本实验选20min, 见图8。 2.1.7 结合物的稳定时间 待反应完全后, 每隔一段时间测定一次缔合物的吸光度值。结果表明, 显色完全后, 缔合物溶液吸光度2小时内保持不变。 2.2 就业曲线的绘制 在上述确定的最佳条件下, 维生素c质量浓度在0-12μg·mL 2.3 样品处理和分析 准确称量一定质量的新鲜果蔬 (本文定为15g) , 放入研钵中, 多次加入10mL1mol·L