枯草芽孢杆菌中高效响应_i_N_i_-乙酰神经氨酸生物传感器的构建.docxVIP

2502 2502 生 物 工 程 学 报 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn DOI: 10.13345/j.cjb.220961 孙佳琦 等/枯草芽孢杆菌中高效响应 N-乙酰神经氨酸生物传感器的构建 Jun. 25, 2023, 39(6): 2502-2516 ?2023 Chin J Biotech, All rights reserved ·关键核心技术 · 刘延峰 江南大学生物工程学院研究员、博士生导师。主要从事利用合成生物技 术构建细胞工厂用于合成重要营养化学品及食品组分的应用基础研究。近年来在 Nature Communications、Metabolic Engineering 和 Biotechnology and Bioengineering 等领域内权威期刊发表论文 20 余篇， 申请发明专利 25 项， 授权发明专利 12 项； 主持包括国家自然科学基金面上项目、青年基金， 国家重点研发计划子课题， 江 苏省自然科学基金优秀青年基金等在内的省部级科研项目 10 项。入选中国科协 “青年人才托举工程”项目(2017)，获得江苏省科学技术一等奖(2020) 、“ 闵恩泽能 源化工奖青年进步奖” (2019)。现为 Frontiers in Bioengineering and Biotechnology 期刊编委、国际生物过程协会会员。 枯草芽孢杆菌中高效响应 N- 乙酰神经氨酸生物 传感器的构建 孙佳琦 1,2 ，曹燕亭 1,2 ，吕雪芹 1,2 ，李江华 1,2 ，刘龙 1,2 ，堵国成 1,2 ，陈坚 1,2， 刘延峰 1,2* 1 江南大学生物工程学院 糖化学与生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 2 江南大学未来食品科学中心， 江苏 无锡 214122 孙佳琦 孙佳琦, 曹燕亭, 吕雪芹, 李江华, 刘龙, 堵国成, 陈坚, 刘延峰 . 枯草芽孢杆菌中高效响应 N- 乙酰神经氨酸生物传感器 的构建[J]. 生物工程学报, 2023, 39(6): 2502-2516. SUN Jiaqi, CAO Yanting, Lü Xueqin, LI Jianghua, LIU Long, DU Guocheng, CHEN Jian, LIU Yanfeng. Development of biosensors highly responsive to N-acetylneuraminic acid in Bacillus subtilis[J]. Chinese Journal of Biotechnology, 2023, 39(6): 2502-2516. 摘 要： 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是公认的食品安全菌株， 目前已被用于多种高附加值产品 的生物合成， 包括被广泛用作营养化学品和药物中间体的 N- 乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid, NeuAc)。响应目标产物的生物传感器被广泛用于代谢工程中的动态调控和高通量筛选等方面， 以 提高生物合成效率。但是， 枯草芽孢杆菌中缺乏可高效响应 NeuAc 的生物传感器。因此， 本文首 先测试和优化了能将胞外 NeuAc 转运进胞内的转运蛋白，获得了一系列具有不同转运能力的菌株， 以用于后续响应 NeuAc 的生物传感器的验证； 随后将响应 NeuAc 的转录因子 Bbr_NanR 的结合位 点插入枯草芽孢杆菌组成型启动子的不同位置，筛选具有活性的杂合启动子；接下来，通过在具 有 NeuAc 转运能力的枯草芽孢杆菌中表达 Bbr_NanR，选择能响应 NeuAc 的杂合启动子，并进一 资助项目： 国家重点研发计划(2018YFA0900300)；国家自然科学基金；江苏省自然科学基金(B This work was supported by the National Key Research and Development Program of China (2018YFA0900300), the National Natural Science Foundation of China , and the Natural Science Foundation of Jiangsu Province, China (B. *Corresponding author. E-mail: yanfengliu@ Received: 2022-12-01;