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不同品种大米发酵紫色红曲霉产色素的特性分析
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夏欣欣,陈迪,姜凌,刘曼丽,孙晶晶,郭明伟,吴兴泉
(河南工业大学生物工程学院,河南郑州 450001)
红曲霉属是一个多功能的丝状真菌类群,包括从毛红曲菌(Monascus pilosus)、紫色红曲菌(Monascus purpureus)、红色红曲菌(Monascus ruber)、烟色红曲霉(M. fuliginosusSato)、发白红曲霉(M. albidus)、锈色红曲霉(M. rubiginosus)、变红红曲霉(M. rubropuncatatus Sato)、橙色红曲霉(M. aurantiacus)等。红曲菌属真菌门,子囊菌亚门,真核菌纲,散囊菌目,红曲科[1]。在亚洲国家,如中国、日本、泰国等,红曲丝状真菌被用于天然色素、食品成分和食品添加剂的生产。其中最著名的就是红曲米,又称红槽、赤曲等[2]。传统上红曲霉以大米为固态发酵基质,发酵后成为我国传统食用着色剂红曲米[3]。红曲米外观呈砖红色或紫红色,质脆且断面为红色或粉红色[4]。
中国食品自古讲究色、香、味俱全,着色剂更是自古以来就被用于食品中,以改善食品的外观、风味、口感和营养品质[5]。食品着色剂根据来源不同可分为植物着色剂、动物着色剂、微生物着色剂及化学合成着色剂[6]。合成色素具有潜在的毒性和致癌性,天然食用色素则更具安全性、营养价值和药用价值,因此天然食用色素更受大众认可[7-9]。微生物以农业和食物废弃物为基质,在细胞内外产生色素,具有生产力高、可持续发展、成本低廉的特点,是最有前途的食用色素来源[10,11]。红曲色素作为微生物来源的天然食用色素,是红曲霉的重要次生代谢产物,具有生产方便、底物廉价、在酸性水和乙醇中溶解性好、存在大量生物活性代谢物、在一定条件下生产安全等优点,具有很好的经济价值[12]。红曲色素可以用作食品着色剂,改善食品风味,且具有抗菌性能[13]。红曲色素是聚酮类和氮杂类化合物,含氧双环核和四元中心,是红曲霉代谢中多种聚酮类化合物的混合物,由红、黄、橙三类化学结构相近的色素构成,其中既有醇溶性色素又有水溶性色素[14-17]。最常见的红曲色素是红色的红曲红胺素(Monascorubramine)与红斑胺素(Rubropunctamine),橙色的红曲红素(Monascorubrin)与红斑素(Rubropunctatin),黄色的红曲素(Monascin)与红曲黄素(Ankaflavin)[18]。
目前,在我国国标规定的天然色素中,红曲色素已经根据不同色调被分别列出:红曲红色素、红曲黄色素、红曲米粉,生产不同色调的红曲色素已成为适应市场需求的发展趋势。大米作为一种淀粉质营养源,自古以来就是红曲菌的培养基,在中国有长达近两千年的应用历史。当前研究中常以粳米为基质发酵红曲霉,而对比不同大米品种发酵红曲霉的研究报道并不多见。本研究分别以粳米粉、籼米粉、糯米粉为基质进行红曲菌的液态发酵,探究大米品种对红曲霉生长、红曲色素颜色特性以及安全性的影响,以期为生产多色调红曲色素提供技术参考。
1 材料与方法
1.1 材料
市售糯米、籼米、粳米,购于河南省郑州市永辉超市,打粉后过100目筛;红曲菌种为实验室保藏菌种Monascus purpureusM9(strain NO. CGMCC 3.19586)。
1.2 实验方法
1.2.1 大米成分的测定
参照GB 5009.268-2016食品中多元素的测定第一法:电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定粳米、籼米、糯米的微量元素。水分测定则将大米粉(粳米粉、籼米粉、糯米粉)放入烘箱烘干至恒重,称量烘干前后质量。参照GB 5009.6-2016第一法:索氏抽提法,测定大米粉中的脂肪。参照GB 5009.5-2016第一法:凯氏定氮法,测定大米粉中的蛋白质。
采用双波长的方法测定直链淀粉和支链淀粉的含量,具体方法参照张雪梅等[19]的方法,分别测定样品溶液在631、437、542、763 nm波长下的吸光度值,根据直链淀粉和支链淀粉标准曲线分别算出样品的直链、支链淀粉和总淀粉的质量分数。
1.2.2 培养基配方
斜面培养基:将麦芽汁糖化液稀释至10度,加入3%琼脂,于121 ℃灭菌20 min,取出后摆斜面。
种子培养基:葡萄糖6 g,蛋白胨2 g,NaNO31 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KH2PO41 g,用水定容至100 mL,121 ℃灭菌20 min。
液体培养基:大米粉(粳米粉、籼米粉、糯米粉)2.5 g,NaNO30.15 g,MgSO4·7H2O 0.05 g,KH2PO40.075 g,用水定容至50 mL,121 ℃灭菌20 min。
1.2.3 液态发酵红曲霉M9
向活化好的菌株中加入
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