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早熟中华绒螯蟹眼柄视力节的光镜观察 中国毛蟹早熟的出现是一个极其复杂的生理过程，可以由多种激素共同作用。 1 材料和方法 1.1 螯蟹、克氏原螯虾 中华绒螯蟹和克氏原螯虾 ( 1.2 1.2.1 早熟脉象及叶柄、神经节和提取物的制备 眼柄视神经节的解剖、眼柄提取物的真空冷冻干燥制备主要参照 1.2.2 性早搏眼前神经鞘对性腺发育的影响 在96孔细胞培养板的小孔中加入1cm 1.2.3 甲基法尼酯fa的制备 根据由法尼酸 (methyl farnesoate, FA) 生成甲基法尼酯 (methyl farnesoate, MF) 时, 利用 1.2.4 早熟脉象早期蒸发对甲基法尼酯合成的影响 用75% ( 1.3 材料选取及细胞直径测定 本文所有的卵巢组织学测量数据均取自于同批卵巢的卵母细胞, 随机选取30个切到卵核的卵母细胞, 细胞直径、胞核直径按细胞及胞核的最大长径计算, 每个实验组重复平行实验3次.记录数据为平均值±标准偏差 2 结果 2.1 窦腺、内髓和端髓 中华绒螯蟹眼柄视神经节位于复眼和视神经节薄层下方, 由外髓 (medulla externa, ME) 、内髓 (medulla interna, MI) 和端髓 (medulla terminalias, MT) 3部分组成 (图1) .窦腺 (sinus gland, SG) 位于内髓和端髓交界处的腹侧, 外观显乳白色, 略扁平, 呈小窦状突起 (图1-1) . 外髓、内髓和端髓外周分布有大小不一的神经分泌细胞 (neurosecretory cell, NSC;图1-1) , 而在眼柄末端的端髓区域可明显区分为大型和小型2类神经分泌细胞, 而细胞大小介于两者之间的称为中型神经分泌细胞 (图1-2) . 2.2 2.2.1 性早熟中华绒螯蟹卵母细胞的发育情况 中华绒螯蟹眼柄视神经节与同种卵母细胞体在体外培养24h后, 将对照组和处理组的卵巢组织分别进行石蜡切片观察, 对比2组卵母细胞的发育情况 (表1和图2) . 实验中所用的性早熟中华绒螯蟹卵巢呈淡褐色, 卵母细胞处于大生长期, 胞质嗜酸性, 卵黄开始迅速积累, 卵黄颗粒变大, 分布于胞质周边部位, 但近胞核的卵黄颗粒仍细小而均匀 (图2-1) .经过与眼柄视神经节培养后 (图2-2) , 处理组的卵母细胞直径和核径均比对照组显著减小 ( 2.2.2 性早熟中华绒螯蟹卵母细胞的发育特点 中华绒螯蟹眼柄视神经节与异种卵母细胞体在外培养24 h后, 将对照组和处理组的卵巢分别进行石蜡组织切片, 对比观察2组卵母细胞的发育情况 (表2和图3) . 实验中所用的螯虾卵巢呈淡棕色, 比性早熟中华绒螯蟹的卵巢略显成熟, 主要由处于卵黄合成后期的卵母细胞组成, 但还含有少量的卵原细胞及卵黄合成前期和中期的卵母细胞 (图3-1) .卵黄合成前期和中期的卵母细胞呈嗜碱性, 胞核相对较大;卵黄合成后期的卵母细胞细胞质呈嗜酸性, 胞核相对较小.为了便于比较实验结果, 表2数据均测于卵黄合成后期的卵母细胞.螯虾的异种卵巢经中华绒螯蟹眼柄视神经节培养处理后 (图3-2) , 其卵母细胞直径和核径的变化与中华绒螯蟹自身卵母细胞培育相似, 出现不同程度的抑制作用, 抑制率分别为15.32%和12.23%, 差异显著 ( 2.3 视力节粗提物对mo生物合成mf的抑制率 将中华绒螯蟹眼柄视神经节粗提物的冻干品, 经PBS生理盐溶液稀释后配成5个不同剂量浓度, 分别是每10mm 随着眼柄中华绒螯蟹眼柄视神经节粗提物浓度的增高, 对MO生物合成MF的抑制率也逐渐增强, 0.10当量时抑制率为13.92%, 1.00当量时抑制率达83.08%, 抑制率增高了将近70%.此外, 低浓度组 (0.10～0.25当量) 抑制率增长较快, 从13.92%增至46.70%, 增长将近2.35倍;高浓度组 (0.50～1.00当量) 抑制率增长缓慢, 从74.54%至83.08%仅增长了约11%. 2.4 合成中华绒螯蟹mf的速率 眼柄镊烫第1天, 2个处理组中华绒螯蟹MO合成MF的速率与对照组 (正常眼柄) 均无显著差异 ( 3 性早熟中华绒螯蟹眼柄神经激素mf的分离和研磨 中华绒螯蟹眼柄视神经节由3部分组成:外髓、内髓、端髓, 其中端髓体积最大, 外髓次之, 内髓最小, 窦腺贴附于端髓内侧.神经分泌细胞主要分布于外髓、内髓、端髓的表层, 尤以端髓部分较多.端髓神经分泌细胞较大, 呈圆形或椭圆形, 被染成较深的红色.对正常发育的中华绒螯蟹眼柄神经分泌细胞的种类或类型存在不同的看法. 眼柄是虾蟹类动物激素调节的一个内分泌中枢 切除眼柄后的亲体可以缩短性腺发育和恢复的时间, 雌体甚至无需经过营养的充分积累就能再次繁殖和产卵. 本研究还揭示性早熟中华绒螯蟹眼