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《基因工程》课程教学大纲 Gene Engineering 一、课程基本信息 课程代码：040916 学 时：24 学 分：2.0 考核方式：考试，平时成绩占总成绩的百分之30。 中文简介： 基因工程技术是在分子水平上采用类似于工程设计的方法，按人类的需要产生不同的基因产物或定向的创造生物的新性状，使之稳定地遗传给子代。基因工程的发展带动了以其为核心的生物技术的发展，它的发展也促进了整个生命科学的发展。课程的教学目的是让学生了解作为20世纪生命科学最辉煌的成就——基因工程技术30年来的发展史，特别是近年来飞速发展的新技术和新应用的进展如何使整个人类社会生活方式发生了重大变革。 二、教学目的与要求 教学目标：学生通过本课程的学习，能够掌握基因工程的基础知识和基本理论，包括各种工具酶的特性，分子克隆载体特点及应用、大分子的分离和分析、PCR技术的原理及应用、核酸分析技术、DNA序列分析、DNA诱变、DNA文库的构建、基因组分析和微生物基因工程等内容。了解基因工程在工业、农业、医药、环境保护等方面的实际应用以及基因工程在生命科学发展中的重要作用。 教学要求：基因工程学是实践性很强，发展速度很快的学科，要求在教学中重视理论和实践相结合，使学生掌握基因工程的基本理论知识、基因工程中用到的基本方法与实验技术，了结基因工程学领域的最新进展，进而激发学生的创新意识和创新潜能，培养学生的科学研究能力和实际应用能力。 三、教学方法与手段 本门课程内容以教师讲授为主，同时根据实际情况组织课堂分组讨论等形式进行。在根据专业特点组织学生进性文献学习及讨论等内容。 四、教学内容及目标 教学内容 教学目标 学时 分配 第一章 基因工程概述 掌握基因操作和基因基因工程等基础概念，基因工程创建的科技基础，了解基因工程的诞生和发展历史等。 2 重点与难点 重点为本章内容的中的基本概念，相关的分子生物学知识。 衡量学习是否达到目标的标准: 通过课堂提问测试学生是否能达到目标。 第二章 分子克隆工具酶 4 第一节 限制性内切酶 掌握修饰限制系统，限制性内切酶的分类及各自特点，II型限制性内切酶的酶学性质，酶切位点结构等内容。 2 第二节 DNA聚合酶 掌握基因工程操作中常用的几种DNA聚合酶的催化特性，应用方法等内容。 1 第三节 其他分子克隆酶 掌握常用的其他几种常用的分子克隆酶，如转录酶，连接酶、T4多核苷酸激酶、核酸酶等相关酶的催化特点，应用方法等。 1 重点与难点: 重点内容为基因工程操作中常用几种酶类如限制性内切酶、DNA聚合酶、转录酶，连接酶等的酶学性质及应用。难点内容修饰限制系统、和各种的酶在基因工程中具体作用。 衡量学习是否达到目标的标准 通过课堂提问测试学生是否能达到目标 第三章 分子克隆载体 2 第一节 质粒载体 掌握质粒的基本特性；标记基因；质粒载体的种类及特征，了解质粒载体pBR322的构建。 1 第二节 表达载体 掌握表达载体的结构及常见的表达工作方式 1 重点与难点: 重点内容为基因工程中常用各种载体如质粒载体的性质及应用。难点内容a筛选原理、黏粒载体的构建等。 衡量学习是否达到目标的标准 通过课堂提问测试学生是否能达到目标。 第四章 目的基因的制备与鉴定 8 第一节 基因数据库中获取目的基因 掌握GENEBANK查找和分析基因的方法，熟悉相关软件如BLAST、Primer-BLAST等。 2 第二节 基因文库的构建 掌握DNA和cDNA文库的类型、DNA文库好坏的评价方式及DNA文库构建的整个流程。了解扣除杂交cDNA文库、全长cDNA文库的构建方法。 2 第三节PCR技术及应用 掌握PCR技术的原理、反应体系、反应程序过程的能内容；掌握反向PCR、热不对称PCR等方法的基本原理与过程；掌握实时荧光定量PCR的定量原理与方式、荧光标记方法等内容。 2 第四节 基因操作中大分子的分离和检测 掌握DNA和RNA的提取、Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及重组DNA分子导入等内容；掌握凝胶阻滞实验、DNaseI足迹实验、酵母单杂交实验、染色体免疫沉淀实验、RNA的SI核酸作图等基本方法及原理，了解RNAi干扰现象及大分子物质相互作用的最新进展 2 重点与难点: 重点内容为DNA和RNA的提取、Southern杂交、Northern杂交、Western杂交及重组DNA分子导入等内容；凝胶阻滞实验、DNaseI足迹实验、酵母单杂交实验、染色体免疫沉淀实验、RNA的SI核酸作图。难点内容Southern杂交、Northern杂交、Western杂交的基本原理与应用。 衡量学习是否达到目标的标准 通过课堂提问测试学生是否能达到目标。 第五章 目的基因导入受体细胞 掌握CaCl2转换法