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鸡马立克氏病的诊断与鉴别诊断 鸡马立克病是一种由淋巴组织增生引起的疾病。它的特点是神经腺体、结膜、内脏器官和肌肉。本病由一种疱疹病毒引起, 传染性强。在病原学上与鸡的其他淋巴肿瘤不同。马立克氏病毒是一种细胞结合性病毒, 分三个血清型:1型为致瘤的MDV, 2型为不致瘤的MDV, 3型为HVT。病毒核衣壳呈六角形, 85-100nm, 带囊膜的病毒粒子直径150-160nm, 羽囊上皮细胞中的带囊膜病毒粒子273-400nm, 随角化细胞脱落成为传染性很强的无细胞病毒。MDV基因组是线状双股DNA, 166-184kb, 很难从感染细胞的总DNA中分离出来。本病多发生于2月龄以上的鸡。鸡是马立克氏病最重要的自然宿主, 病鸡和带毒鸡是主要传染源。病毒通过直接或间接接触经气源传播, 在羽囊上皮细胞中复制的传染性病毒, 随羽毛皮屑排出。本病有内脏型, 神经型, 皮肤型, 眼型, 混合型几种病变类型, 一般神经型是最容易看到的, 当支配腿部运动的坐骨神经受到侵害时, 病鸡开始只见走路不稳, 逐渐看到一侧或两侧腿麻痹, 严重时瘫痪不起。典型症状是一腿向前伸, 一腿向后伸的“大劈叉”姿势。病侧肌肉萎缩, 有凉感, 爪子多弯曲, 当支配翅膀的臂神经受侵害时, 病鸡翅膀松弛无力, 有时下垂如穿“大褂”, 上述症状比较常见, 有时出现一种症状, 有时同一个体出现多种症状, 病鸡采食困难, 饥饿, 脱水消瘦, 最后衰竭死亡。内脏型病鸡以众多的内脏出现肿瘤为特征, 多呈急性爆发, 多见于幼龄鸡群, 开始以大批鸡精神萎顿为主要特征, 几天后部分鸡出现共济失调, 随后出现单侧或双侧肢体麻痹, 部分病鸡死亡之前未见临床症状, 呈进行性消瘦, 脱水死亡。神经型病变多见坐骨神经, 臂神经, 迷走神经肿大, 粗细不均, 银白色纹理和光泽消失, 有时发生水肿。法氏囊可出现皮质, 髓质的萎缩坏死和滤泡间的淋巴样细胞浸润, 皮肤型病变主要表现为皮肤毛囊肿大, 毛囊周围组织有大量单核细胞浸润, 真皮内出现血管周围淋巴细胞、浆细胞等增生, 体表常见以羽囊为中心形成大小不等肿瘤或结痂, 病程较长, 且比较少见。眼睛的特征病变是虹膜和睫状肌肉的单核细胞浸润, 有时出现骨髓样细胞。马立克氏病在病理学上尽管有神经型, 内脏型, 眼型与皮肤型之分, 但实际上每一种类型的病变并不严格局限于某一器官系统, 由于马立克氏病的肿瘤性生长是全身性的和多中心性的, 且因患鸡感染MDV的毒株可以不是单一的, 故此肿瘤病灶的分布范围可以广泛和多发。因此, 临床上马立克氏病常常是各型的症状交错出现。 随着养鸡集约化程度的提高, 马立克氏病便成为危害我国养禽业的重要禽病之一。 鸡马立克氏病与禽白血病很难区别, 马立克氏病的肿瘤细胞由多形态淋巴细胞为主, 而禽白血病肿瘤细胞以形态较一致的成淋巴细胞为主, 而且侵害的大部分也是内脏器官, 所以为了能够确诊本病, 首先根据鸡马立克氏病的流行病学, 临床症状和尸体剖检等病理变化方面的特点进行初步诊断, 然后通过取患鸡的病变组织, 通过制作切片进行实验室组织学观察进行确诊, 对于预防和减轻下一个生产周期内疾病的再度发生及其造成的损失极为重要, 同时也为养鸡场制定长期而有效的综合预防措施提供依据。 1. 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 仪器 切片机中华医疗器械厂上海制造 恒温箱重庆银河实验仪器有限公司 光学显微镜重庆光学仪器厂 1.1.2 设备 石蜡, 包埋槽, 小刀, 镊子, 盖玻片, 载玻片, 染色缸等。 1.1.3 试剂 甲醛, 酒精, 二甲苯, 苏木精染液, 氨水, 冰醋酸, 树胶等。 1.1.4 鸡马立克氏病的临床诊断 2008年12月, 河南省安阳市汤阴县鸡场80日龄左右的蛋鸡发生以渐进性消瘦, 逐渐衰竭死亡为特征的一种疾病。我们对鸡进行了临床诊断, 病理剖检和病理组织学检查, 初步诊断为内脏型鸡马立克氏病。在观察剖检变化的同时, 取腺胃, 肝脏, 脾脏, 肺脏, 肾脏等组织1块, 所取组织均以福尔马林溶液固定。 1.2 方法 1.2.1 骨料的脱离性观察 先用水把羽毛沾湿, 背位仰卧, 将两腿拉开, 在腿和腹部切开皮肤, 然后紧握大腿股骨处向前, 向下, 再向外折直, 使股骨头和髋臼完全脱离, 这样尸体仰位会很平稳, 沿中线把胸骨嵴和肛门间的皮肤切开, 然后向前切, 直至身体的整个腹面连同颈部整个暴露出来, 进行胸肌和皮下观察, 然后在后腹部 (龙骨与肛门间) 作一横切线切开腹壁, 伸至腹的两侧。再从腹壁两侧沿肋骨关节向前将肋骨和胸肌剪开, 一直把喙突和锁骨剪断为止, 最后把整个胸壁翻向头部, 整个胸腔和腹腔器官都清楚的显露出来, 进行尸体检查。 1.2.2 组织片的制备 病理组织块用石蜡包埋, 切片, H、E染色, 光镜下观察病理组织变