ph、盐度和碱度对中国林蛙变态脲的毒性效应.docxVIP

ph、盐度和碱度对中国林蛙变态脲的毒性效应 1 生态生态学研究 拉登是中国的重要野生青蛙，主要分布在中国东北部的长白山地区。由于长期的采集和野生资源显著减少，近年来，各地都进行了人工繁殖和繁殖，大大增加了林瓦登的数量和产量。对促进山区经济发展、保护野生动物资源和区域生态平衡发挥了积极作用。 目前,在研究林蛙增殖与养殖技术的同时,对林蛙的繁殖生态学、生长生态学、种群生态学等也有研究报道.王寿兵等对野生林蛙和人工养殖林蛙的肥满度、重/长指标进行了对比研究,并探讨了林蛙幼体对不同环境(如土壤干、湿度、水深等)的生态适应性.李世仪等探讨了干旱环境对中国林蛙体长生长的影响.卢 欣则对不同地理环境下中国林蛙的生殖量特征进行了系统的研究.刘玉文等对中国林蛙在人工养殖生态系统中的生物学特性进行了详尽的观察.胡长群等研究了野外条件下中国林蛙种群数量的分布特征.这些研究成果对实现中国林蛙集约化养殖和提高雌性比例,奠定了理论基础.而林蛙的集约化饲养,增加雌蛙数量,均是目前科研重点内容,也是亟待解决的生产问题. 蝌蚪饲养是中国林蛙人工增殖和养殖的关键技术之一.CaO、NaCl、Na2CO3和NaHCO3是应用“离子诱导法”提高雌性比例的常用盐类,而CaO和NaCl又是蝌蚪饲养过程中常用的消毒防病药物.在实际生产中,因用量不当而导致变态期水体pH、盐度和碱度升高,毒死蝌蚪现象经常发生,直接影响了变态幼蛙数量,然而水生态与环境因子对其本身影响的研究相对较少.本研究旨在为促进林蛙资源增殖和人工养殖业的发展,保护该物种资源提供理论资料. 2 材料和方法 2.1 实验动物、设备 实验用蝌蚪为41日龄的变态期蝌蚪,取自吉林省柳河县大泉眼中国林蛙增殖与养殖基地试验场,体长19.2±4.7 mm,体重413.4±97.2 mg,体质健壮,无伤病,实验前用塑料大盆暂养2 d.实验容器为6 L的圆形塑料盆.以饲养池水为实验用水(源于山泉),pH 7.0～8.5,含盐量(S)0.18 g·L-1,碱度(A)1.41 mmol·L-1.每只盆盛水5 L,随机投放蝌蚪15尾. 2.2 盐度、碱度 分预备实验和正式实验2步进行.预备实验按等差数列的方法,以公差0.5,在3.0～12.0之间设置20个梯度组,每组5尾蝌蚪.根据各组死亡情况,确定正式实验pH梯度分别为3.7、3.9、4.1、4.3、9.5、9.7、10.2、10.5、11.0,并设1个对照组(蝌蚪饲养池水,下同).每组设2次重复,结果取其平均值(下同).实验期间,用0.1 mol·L-1HCl和NaOH调节pH.各组盐度、碱度均保持在蝌蚪池水平. 以水中NaCl含量作为盐度指标.NaCl为市售食用精盐.按几何级数间距,设置6个预备实验组,盐度分别为20.0、10.0、5.0、2.5、1.25和0.625 g·L-1,每组5尾蝌蚪.根据预备实验结果,以公差1.0 g·L-1,在2.0～10.0 g·L-1之间设置9个浓度梯度和1个对照组.每组设3次重复.各组pH、碱度均与蝌蚪池相同. 根据野外蝌蚪池水体碱度较低的特点,在2.0～20.0 mmol·L-1之间设置10个梯度和1个对照组.每组设2次重复.碱度用市售Na2CO3和NaHCO3控制.实验期间水的pH因受空气CO2分压和蝌蚪呼吸的影响而略有变化,在校正pH的同时也影响了碱度的变化,故碱度梯度采用实测值.各组盐度、pH均保持蝌蚪池水平. 2.3 ph、碱度实验 实验水pH采用雷磁B-4型酸度计监测;碱度用0.02 mol·L-1的HCl标定,以酚酞、甲基橙-苯胺蓝(混合)作指示剂;用Winkler法监测溶解氧(DO).采用机率单位回归法计算碱度、盐度的半致死浓度(LC50);用算术比例法计算pH的LC50、全致死浓度(LC100)、零致死浓度(LC0)和碱度、盐度的LC100、LC0.碱度、盐度的安全浓度(SC)计算公式为:SC =48 h LC50×0.3/(24 h LC50/48 h LC50)2.实验中若对照组出现偶然死亡现象,采用公式p=(p′-c)/(1-c)进行校正.式中,p′为试验组观察死亡百分数,c为对照组死亡百分数,p为校正后的死亡百分数. 实验在山间蛙池边进行.实验期间水温16～18 ℃,气温17～22 ℃,DO 5～8 mg·L-1.为保持实验溶液浓度的大致稳定和防止水质恶化,pH、碱度实验每隔12 h更换50%水量,盐度实验不换水.各组均不投饵.及时捞出死亡个体,每隔24 h统计1次死亡数.蝌蚪死亡判别标准是:失去游泳能力,身体侧翻并沉入水底,对外来刺激(如针刺)毫无反应. 3 结果与分析 3.1 最适ph的确定 中国林蛙变态蝌蚪在不同pH组的急性中毒表现呈双向剂量反应,死亡率先随着pH升高而下降,又随着pH继续升高而增加(表1).p