布鲁菌病的危害与防控.docxVIP

布鲁菌病的危害与防控 感染柳绿菌病是由柳绿菌（alicela）感染身体，并引起感染和转化的人类疾病。该病的分布比较广泛,世界范围性威胁人类健康和影响畜牧业发展,该病是世界动物卫生组织(OIE)规定必须强制报告的疫病。 1 布鲁菌的分离和传播 布鲁菌是一种革兰氏阴性、细胞内寄生菌,能引起人和多种动物的急性和慢性感染,被感染的人和动物表现流产及不孕不育等症状。根据致病性的不同和宿主特异性,将布鲁菌分为6个种,分别是马耳他布鲁菌、流产布鲁菌、猪布鲁菌、绵羊布鲁菌、犬布鲁菌和沙林鼠布鲁菌。布鲁菌感染的宿主极广,家畜中主要是牛、羊、猪最易感,传染源是病畜和阳性带菌畜。布鲁菌病主要由病畜及其流产胎儿、乳和乳制品、肉和肉制品、皮毛等病源进行传播。动物布鲁菌病主要由羊布鲁菌、牛布鲁菌和猪布鲁菌感染羊、牛和猪等动物,呈急性或慢性经过。另外,病畜和阳性带菌畜是人布鲁菌的主要传染来源。世界动物卫生组织(OIE)将布鲁菌列为B类重要传染病,我国也将布鲁菌病列为乙类传染病。 2 布鲁菌病的检疫 为确诊动物布鲁菌病,首先要尽可能分离病原,鉴定生物型,但该方法操作复杂,所用时间长,而且阳性检出率低。因此,布鲁菌病最常用的检疫技术是血清学诊断。目前,我国常用的血清学诊断方法有琥红平板凝集试验、试管凝集试验、补体结合试验和全乳环状试验。随着分子生物学的发展,近年来又发展起来一些新的诊断方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)和PCR检测方法。 2.1 细菌的分离 2.1.1 氧合并剂对37温箱及信箱的影响 采集病牛的全血、牛奶、流产胎衣各2份,分别接种于胰蛋白胨培养基培养。1份在37℃温箱中需氧培养,另1份在37℃含5%~10%CO2烛缸中培养,分别在第2天、第3天、第4天、第5天进行观察,以后每隔3~4 d观察1次,共3周。如发现有可疑菌落,即作初步鉴定,当确认为布鲁菌,再作进一步鉴定。 2.1.2 不同的胰蛋白培养基 将流产胎衣磨碎制成10%乳剂,每只豚鼠股内侧皮下注射2 m L,接种豚鼠4只,饲养31 d处死,取豚鼠全血、腹股沟淋巴结、颌下淋巴结、肝、脾、肺等各2份,分别接种于特制的胰蛋白胨培养基,分离布鲁菌。方法同上。同时,可以分离血清,进行血清学检查。 2.2 血液清学 2.2.1 鲁菌病流行病学初筛 因检测速度较快,琥红平板凝集试验常用于布鲁菌的田间筛选,成为一种畜间布鲁菌病检疫和人间布鲁菌病流行病学快速初筛的检测方法。该方法是将0.03 m L血清加在0.03 m L琥红抗原里,混匀后,在阴、阳性血清对照成立的条件下,对被检血清进行判定。待检血清在4 min中内无凝集现象,呈均匀粉红色者,判为阴性(-),出现肉眼可见凝集现象者,判为阳性(+)。 2.2.2 主管静处理方法 2.2.3 全乳现状内涵的判定 采乳样时,应将母畜的乳房用温水洗净、擦干,然后将乳汁挤入洁净的器皿中,采集新鲜的乳样。方法是将1 m L乳样置于灭菌凝集试管内,将1滴充分振荡混合均匀的全乳环状抗原加入乳样中,充分混匀后,于37~38℃水浴60 min。然后取出试管,立即进行判定:强阳性(+++),乳脂层呈红色环,乳柱呈白色;阳性(++),乳脂层的环带呈红色,但不显著,乳柱略带颜色;弱阳性(+),乳脂层的环带颜色较浅,但比乳柱颜色略深;阴性(-),乳柱上层无任何变化,乳柱颜色均匀。 2.2.4 试验方法及标准 补体结合试验准确性高,容易判定,对抗原纯化要求不严格,因而普遍用于传染病的诊断。但该试验的不足之处是操作繁琐,对操作人员的要求比较严格,对所用试剂的准备和量化要求较严。试验方法及判定标准参照《布氏杆菌补体结合试验操作规程》SN/T 1089-2002标准进行。该试验所需试剂有绵羊红细胞悬液、阴性对照血清、阳性对照血清、溶血素、抗原、补体等。判断标准是0~40%溶血判为阳性反应;50%~90%溶血判为可疑反应;100%溶血判为阴性反应。牛、羊和猪补体结合反应判定标准均相同。 2.2.5 elisa法 ELISA试验操作简单,目前已应用于国际贸易牛的布鲁菌的检测。这种方法不但可用于血清学诊断,还可用于乳汁检查。应用ELISA方法检测畜间布鲁菌的报道相当多,表明这是一种公认的诊断方法。但ELISA诊断试剂盒的价格较为昂贵,很难在基层实验室里规模化使用。 2.3 动物间布鲁菌的pcr扩增检测方法 3 布鲁菌病防控项目 《国家中长期动物疫病防治规划(2011-2020)》将布鲁菌病的防控纳入重点开展项目。布鲁菌病的防控工作要坚持“预防为主”的方针,采取以监测、检疫、扑杀为主的综合性防控措施。 3.1 防同时注射口腔灌服 猪型布鲁菌S2菌苗由中国兽药监察所于1964年从猪体选育自然弱毒株研制而成,是一株减弱的布鲁菌活菌苗。该疫苗已广泛应用于控制猪、牛、绵羊、山羊的布鲁菌病,对绵羊、山羊