gc法测定罗浮山草酸油中樟脑、水杨酸甲酯、丁香酚的含量.docxVIP

gc法测定罗浮山草酸油中樟脑、水杨酸甲酯、丁香酚的含量 罗浮山草坪油的质量标准载于《部出版的中药成方制剂》第20卷。本品由68种中药产品组成，如针、许长清、何衣花、红花、金不换、铁线莲等，以及樟脑、水杨酸、薄荷油和丁香油。具有驱风解毒、消肿胀止痛的功效，主要用于感冒、头痛、昆虫和蚊子伤口、无名肿毒、划船头晕等。本品方中含樟脑、水杨酸甲酯、丁香油是挥发性成分, 可采用气相色谱法测定含量, 经预试, 本法简便、快捷, 专属性强, 线性关系良好。 1 药品、化学品测定 GC-14C气相色谱仪, FID检测器 (日本岛津公司) , N2000色谱工作站; GR202电子分析天平 (日本AD) ;台式超声清洗器 (SK250LHC, 上海科导超声仪器有限公司) ;对照品:樟脑对照品 (批号:747-200106, 供含量测定用) ;水杨酸甲酯对照品 (批号:110707-200107) ;丁香酚对照品 (批号:725-200009, 供含量测定用) ;均购自中国药品生物制品检定所;供试品:罗浮山百草油样品 (由广东罗浮山国药股份有限公司生产) ;试剂:环己醇 (天津市永大化学试剂开发中心;分析纯) ;丙酮 (广州化学试剂厂;分析纯) 。 2 fid过滤器日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本日本,现用随机式 弹性石英毛细管柱 (柱长30 m, 内径0.5 mm, 涂层厚度1.0 μm) DB-WAX;柱温为程序升温, 初始温度90℃, 保持3 min, 以每分钟15℃的速率升温至164℃, 保持5 min, 再以每分钟20℃的速率升温至240℃, 保持4 min;FID检测器 (日本岛津公司) , 温度250℃, 进样口温度230℃, 载气为氮气, 进样量为1 μl;分流比50 ∶ 1;理论板数按环己醇峰计算应不低于20000。 3 溶液的制备 3.1 内标溶液 取环己醇适量, 精密称定, 加丙酮制成每25 mg/ml的溶液, 摇匀, 即得。 3.2 丁香酚、丁香酚的合成 分别取对照品樟脑15 mg、水杨酸甲酯125 mg、丁香酚7.5 mg, 精密称定, 置25 ml量瓶中, 精密加入内标溶液2 ml, 加丙酮至刻度, 摇匀, 即得。 3.3 试验溶液 取罗浮山百草油约0.5 g, 精密称定, 置25 ml量瓶中, 精密加入内标溶液2 ml, 加丙酮至刻度, 摇匀, 即得。 4 线性方程的测定 4.1精密称取对照品樟脑91.58mg、丁香酚150.62 mg、水杨酸甲酯1252.25 mg, 分别置50 ml量瓶中, 加丙酮溶解并定容, 备用; 4.2线性关系①分别精密量取上述4.1中樟脑、丁香酚溶液各1, 2, 5, 10, 15 ml, 置25 ml量瓶中, 加丙酮稀释溶解并定容, 摇匀;吸取上述稀释后的5种溶液及4.1中溶液各1 μl进样, ②吸取上述4.1中稀释后的水杨酸甲酯6种溶液各1 μl 进样;记录色谱图, 以系列溶液的浓度作为横坐标 (X) , 对照品峰面积/内标物峰面积的比值作为纵坐标 (Y) , 进行线性回归;得线性方程:①樟脑y=0.5236x-0.0065, r2=0.9998;②丁香酚y=1.8651x-0.0124, r2=0.9999;③水杨酸甲酯y=0.3328x-0.0319, r2=0.9997;结果表明, 樟脑浓度在0.0733 mg/ml～1.8316 mg/ml的范围内、丁香酚浓度在0.0482 mg/ml～1.2050 mg/ml的范围内、水杨酸甲酯浓度在1.2400 mg/ml～12.4000 mg/ml的范围内, 呈良好的线性关系。 5 产品的专属性 根据本品处方比例量, ①取除樟油、樟脑外的其余药材, 按制法制成缺樟油、樟脑阴性样品;②取除水杨酸甲酯外的其余药材, 按制法制成缺水杨酸甲酯阴性样品;③取除丁香罗勒油外的其余药材, 按制法制成缺丁香罗勒油阴性样品;取上述阴性样品, 分别按3.3项下供试品溶液的制备方法制成缺樟油、樟脑的阴性对照溶液、丁香罗勒油阴性对照溶液和水杨酸甲酯阴性对照溶液。依法测定, 结果在阴性溶液色谱中, 与樟脑、水杨酸甲酯、丁香酚保留时间相同处无杂质峰干扰, 表明方法专属性强;同时, 供试品中樟脑、水杨酸甲酯、丁香酚峰与相邻峰分离度均大于1.5, 内标物环己醇与相邻峰分离度大于1.5, 符合《中国药典》含量测定的基本要求。见图1～7。 6 样品的精密度试验 取同一份对照品溶液, 精密量取1 μl进样, 重复进样6 次, 每次测得樟脑、水杨酸甲酯、丁香酚的峰面积与相应内标峰面积之比的RSD分别为:0.86%、1.57%、1.19%, 表明本方法精密度符合规定。 7 重复使用 7.1 rsd值的测定 取同一批供试品6份, 分别按3.3项下方法制