钙和鸡冠花黄酮提取物对废用性骨质疏松大鼠的作用.docxVIP

钙和鸡冠花黄酮提取物对废用性骨质疏松大鼠的作用 骨密度受到许多因素的影响，如运动、饮食、激素代谢等。钙是人类生命活动所必需的无机盐,主要贮存在骨骼和牙齿中。随着人口日益老龄化,我国废用性骨质疏松症患者将明显增加,有研究表明,废用性骨质疏松,使骨的结构损害,骨小梁变细、中断,数量减少等,从而造成显微骨折,预防废用性骨质疏松症及其带来的危害有重要意义。本研究探讨钙和鸡冠花黄酮提取物对大鼠废用性骨质疏松的作用,进而探讨骨质疏松的发病机制及防治措施。 1 材料和方法 1.1 材料模型的制作 选用健康 SD大鼠40只,雄性,体重(189.8±7.6)g,由本院实验动物学部提供。 将40只SD大鼠按体重排序,然后随机分为5组,每组8只。2~5组为实验组,均捆绑左下肢,制造废用性骨质疏松模型。第1组、第2组分别为正常对照和阳性对照,蒸馏水灌胃 5 ml/(kg·d);第3、4、5组分别灌胃鸡冠花黄酮提取物(Cristata flavonoid)1.440 g/(kg·d)、碳酸钙1.440 g/(kg·d)、鸡冠花黄酮提取物1.440 g/(kg·d)加碳酸钙1.440 g/(kg·d),实验8周。 1.2 骨密度与股骨ct、灰重的检测 实验结束时用代谢笼收集每只大鼠24 h尿,动物眼内眦采血,原子吸收分光光度法测定血Ca,硫代巴比妥酸法测丙二醛(MDA);邻苯三酚自氧化法测SOD;碱性苦味酸法测24 h尿肌酐(Cr)含量,用改良氯胺T法测24 h尿羟脯氨酸(HOP)含量。BH-6012二维扫描骨密度仪(北京核仪器厂)测大鼠股骨骨密度(BMD,g/cm2),用骨模型校准仪器,以镅(241Am)作为放射源。股骨CT检测,用东芝TCT-300/EZ全身CT扫描仪, 以蒸馏水为1H作为参照,测股骨的CT值(H)。股骨干重、灰重含量的测定:将剔除附着软组织的股骨在三氯甲烷和甲醇2∶1混合液中脱脂72 h,置120 ℃烘箱中烘烤1 h,称重。把去脂股骨置坩埚放入Muffer炉中800 ℃灰化12 h,使之呈白色粉末,然后称灰重。 1.3 粉碎研细、抽提 于10月中下旬采收普通鸡冠花的花序,除去种子和茎梗,烘干后粉碎备用。取粉碎研细后的花序用乙醚回流抽提7 h,除脂。脱脂后的样品再用95%乙醇于65 ℃水浴上提取6 h,得乙醇提取液, 60 ℃蒸发干燥得粉剂,溶解后再过滤除菌。 1.4 数据分析的方法 数据采用xˉ±sxˉ±s表示,用SPSS软件进行统计学分析(t检验)。 2 结果 2.1 各组小鼠股骨重、ct值比较 实验初期各组体重无显著差异,实验8周后,阳性组与正常对照组比股骨重、灰分重和CT值均显著下降(P0.05),与阳性组比各预防组股骨重、CT值显著增加, 碳酸钙组、鸡冠花加钙组灰分重显著增加(P0.05),见表1。 与正常对照组比较*P0.05; 与阳性对照组比较△P0.05 2.2 各组大鼠尿钙、尿hop的比较 阳性组与正常对照组相比血清钙减少,尿钙、尿HOP增加(P0.05或P0.01),碳酸钙组与正常对照组相比尿钙增加(P0.05)。与阳性组比各预防组血清钙增加,尿钙、尿HOP减少(P0.05或0.01),见表2。 与正常对照组比较*P0.05**P0.01; 与阳性对照组比较△P0.05△△P0.01 2.3 鸡冠花、鸡冠花加钙对大鼠血清sod、mda、mda的影响 阳性组与正常对照组相比BMD、血清SOD降低,MDA升高(P0.05 或P0.01)。与阳性组相比鸡冠花、鸡冠花加钙组BMD、血清SOD升高,MDA降低,硫酸钙组仅BMD升高(P0.05或P0.01),见表3。 与正常对照组比较*P0.05**P0.01; 与阳性对照组比较△P0.05△△P0.01 3 鸡冠花黄酮类提取物对废用性软骨中sod、mda的调节作用 骨质疏松有相当一部分属于继发性,多由于内分泌、消化道及结缔组织疾患引起,有的与遗传因素有关,而营养状况和活动程度也是发病的关键因素。骨组织和其他组织一样,不断进行着新陈代谢,其代谢方式表现在不断地发生骨吸收和骨形成的过程。 目前认为有3种可调节钙磷代谢的激素,即降钙素、甲状旁腺素及维生素D活性代谢物1,25-(OH)2D3。各种细胞因子由骨组织及其它组织分泌对骨吸收及骨形成起着重要的调节作用。肢体废用后可引起血钙减少,甲状旁腺素分泌增加,使骨吸收加快,最终可导致骨质疏松或骨软化。HOP是反映骨代谢的重要指标之一。当骨骼中磷酸钙溶出排泄增加时,出现骨吸收状态,尿中HOP排泄量增加,可用来评价体内骨吸收的情况。本研究表明阳性对照组尿HOP排泄增加。 鸡冠花黄酮类提取物有许多重要的生物学功能,对于血钙有一定的调节作用,可促进骨的形成,降低骨钙的吸收。在本结果中得到进一步证实,补鸡冠花黄酮类提取物显著降低尿钙丢失,而单