高中生物人教版课件：专题10第4讲动物细胞工程20222023.ppt

(2021·天津静海一中高三月考)Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间黏附分子1(ICAM-1)，导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。 (1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入_______，以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出抗原—抗体反应最_______(填“强”或“弱”)的培养孔所对应的小鼠M。 　强 ICAM-1 (2)取小鼠M的脾脏细胞制成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有____________能力的细胞。核酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。可用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”筛选出特定的杂交瘤细胞。 无限增殖　 融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中______(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。杂交瘤细胞可以在HAT培养基上大量增殖的原因是_______________________________。 (3)将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择________________________的杂交瘤细胞，将其植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 无 杂交瘤细胞可以进行补救合成途径　 大量产生抗ICAM-1抗体　 (4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。 对照组(A) 131I治疗组(B) 单克隆抗体治疗组(C) 给GD模型小鼠腹腔注射0.1 mL无菌生理盐水 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的131I 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1 mL无菌生理盐水的抗ICAM-1单克隆抗体 * * * * 三、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1．动物体细胞核移植技术的概念 (1)供体：动物一个细胞的__________。 (2)受体：____________________________。 (3)结果：重新组合的细胞发育形成新胚胎，最终发育成__________。 细胞核 去核的MⅡ期卵母细胞 动物个体 2．动物体细胞核移植技术的类型 胚胎细胞核 类型 特点 ________________移植 动物胚胎细胞________________，表现全能性相对容易 体细胞核移植 动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难 分化程度低 3．体细胞核移植的过程(以克隆高产奶牛为例) 重构胚 早期胚胎 通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞 用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 将胚胎移入受体（代孕）母牛体内 采集牛卵巢中的卵母细胞，在体外培养到MⅡ期 去核的卵母细胞 供体细胞培养 将供体细胞注入去核的卵母细胞 高产奶牛（供体） 生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛 通过显微操作去核 从供体身体的某一部位上取体细胞 受体细胞为什么选用卵母细胞？ 思考： 卵细胞 次级卵母细胞 第一极体 MⅡ期： 减数第二次分裂中期 卵母细胞作受体细胞的原因： 体积大，易操作；去核时同时吸走第一极体 含有激发细胞核全能性的物质。 　　教材隐性知识： 源于选择性必修3 P54“相关信息”：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是　　　　 　。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的　　　　　。 显微操作法 DNA变性 通过 去除卵母细胞的核，再用 可一并吸出细胞核和第一极体。 可用物理或化学方法（如 、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其 的过程 显微操作 微型吸管 完成细胞分裂和发育 电脉冲 动物细胞核移植 早期胚胎培养 动物细胞培养 胚胎移植 动物细胞融合 重构胚 早期胚胎 通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞 用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程 将胚胎移入受体（代孕）母牛体内 采集牛卵巢中的卵母细胞，在体外培养到MⅡ期 去核的卵母细胞 供体细胞培养 将供体细胞注入去核的卵母细胞 通过显微操作去核 高产奶牛（供体） 从供体身体的某一部位（如耳）上取体细胞 生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛 1.该过程中应用到的技术 ______________ ____