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正交乳酸菌发酵玉米酒糟的研究 这项工作研究并实施了效率低下、节能、节约粮食和污染酒精生产的新技术、新工艺和联合饲料，并显著降低了酒精生产的成本。这是中国发酵技术和酒精行业（特别是燃料酒精行业）20世纪前10年的主要发展方向。随着我国经济的快速发展, 能源短缺问题日益加重, 据统计, 2002年我国实际进口原油7 000万t。与此同时, 我国的农副产品相对过剩, 导致农民收入下降;其中玉米在农副产品中占有重要的位置, 玉米是配合饲料中主要的原料。目前我国饲料年总量达到7 500万t , 饲料工业总产值约为2 000亿元人民币;根据规划, 全国饲料工业到2010年, 配合饲料产量1亿t, 浓缩饲料1 200万t, 添加剂预混合饲料500万t。酒精联产发酵饲料新工艺研究的主要内容就是:将配合饲料产量1亿t中所需20 %的玉米原料即2 000万t首先用于酒精发酵, 可生产800万t酒精。而同时产生的6 400万t的酒糟则与80 %的玉米原料即8 000万t混合后进行乳酸发酵混合饲料的生产, 产量可达到15 000万t (水分含量58 %) , 饲料经过发酵转化后, 其营养成分丰富, 氨基酸分配合理, 适口性好, 而且无需干燥即可长期保持, 成本低, 质量稳定。因此, 酒精联产乳酸发酵饲料新工艺将促进我国燃料酒精工业、农业、饲料工业以及畜牧业的偶联发展, 一方面部分解决了燃料酒精生产的原料来源, 实现酒糟的无污染利用, 保护了环境, 同时大幅度降低酒精生产的总体成本;另一方面, 酒糟乳酸发酵饲料的开发是对我国微生物饲料的丰富和发展, 其合理的营养配比, 良好的适口性, 可长期保存的优点将推动我国饲料工业以及畜牧业的生态化发展, 一定程度上消除了阻碍酒精工业规模化发展的原料、成本和污染三大问题。 在利用玉米酒糟进行乳酸菌发酵饲料新工艺研究实验的基础上, 对酒糟乳酸菌发酵培养基进行了优化研究, 得到最适培养基组成和工艺条件, 力求实现酒精联产饲料的低能耗、低成本、无污染的生态工业模式, 为我国燃料酒精产业和饲料工业的偶联发展提供了可行的工艺路线。 1 材料和方法 1.1 材料表面 1.1.1 硫酸发酵菌 嗜酸乳杆菌, 实验室保藏。 1.1.2 蘑菇培养基 1.1.2. 抗菌活性 葡萄糖1, 胰蛋白胨1, 酵母膏0.5, 柠檬酸铵0.2, 乙酸钠1.5, KH2PO40.6, MgSO4·7H2O 0.1, FeSO4·7H2O 0.003, MnSO4·4H2O 0.001 5, 吐温-80 0.1, pH 5.5 , 0.1 MPa条件灭菌15 min 。 1.1.2. 酒糟3.5m的酒糟1.5和4.5m的酒糟4.5m的酒糟4.5m的水最 葡萄糖1, 蛋白胨0.5, MgSO4·7H2O 0.5, KH2PO40.1, NaCl 0.5 , 酒糟100 mL, pH 5.5 , 0.1 MPa条件灭菌15 min 。 1.1.3 酒糟酸发酵培养基 酒糟、玉米、豆粕、预混料、麸皮等, 实验室配备。 1.2 方法 1.2.1 乳酸发酵种子的制备 将活化好的菌种接种于250 mL三角瓶中, 每瓶装液量100 mL , 37 ℃恒温静置培养48～72 h, 作为酒糟混合料乳酸发酵种子备用。 1.2.2 酒糟混合料乳酸发酵 将制备的酒糟乳酸菌培养液以5 %的接种量接种至酒糟混合料中, 搅拌均匀后, 装入200 mL广口瓶中, 密封好于30 ℃恒温箱中进行酒糟混合料乳酸发酵, 25 d取样进行发酵指标分析。 1.2.3 总糖和恢复糖 总糖是将蒸馏后的残液用6N HCl溶液水解并中和后, 采用DNS法测定;还原糖直接用蒸馏残液过滤后的清液, 采用DNS法测定。 1.2.4 氨基酸自动分析方法 粗蛋白采用Foss Fecator公司2006Digestor和 2300Kjeltec自动分析仪;氨基酸采用日立H825-50氨基酸自动分析仪;其他指标采用常规分析。 1.2.5 ph测量 pHS-3TC酸度计。酸度测定:NaOH滴定法。 1.2.6 计算蘑菇的地方 采用倾注平板法。 1.2.7 测定了醋酸含量 气相色谱法。 1.2.8 乳酸菌发酵正交试验设计 以玉米酒糟为基质, 参照肉鸡混合饲料的组分要求, 根据玉米、豆粕、预混料、麸皮用量的单因素试验确定了乳酸菌发酵正交试验的因素水平见表1。 2 结果与讨论 2.1 酒精糟液的污染利用 玉米原料酒精浓醪发酵后所得的酒糟中残总糖为3.42 %, 还原糖为0.19 %;还含有蛋白质、脂肪、纤维素、矿物质和微生物菌体等营养物质;其中BOD值为28 000～35 000 mg/L, COD 值为35 000～50 000 mg/L 。由于当前酒糟除用于生产DDGS 饲料外 (设备投资过大, 生产能耗成本高, 不适宜