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金黄色葡萄球菌对青霉素、霉素耐药性的研究 金色病原体（sa）是导致医院和社区人群感染和全身感染的最常见病原体之一。这是儿童伤口的主要病原体。由于抗菌药物的滥用,抗药SA明显增加,其中耐甲氧西林SA(Methicillin -resistant Staphylococcus aureus,MRSA)造成的感染已成为日益严重的临床问题。MRSA可同时对β-内酰胺类、加酶抑制剂的复合抗菌药物及碳青霉烯类抗菌药物耐药,因此,临床医生在治疗由MRSA引起的感染及对青霉素和其他β-内酰胺类抗菌药物过敏患者时,可转而考虑使用万古霉素、大环内酯类(如红霉素)、林可酰胺类(如克林霉素)和链阳霉素B类抗菌药物。了解儿童感染SA的耐药谱, 并检测SA对克林霉素的诱导耐药表型,可帮助临床医生考虑是否使用大环内酯类、林可酰胺类、链阳霉素B类抗菌药物。 1 材料和方法 1.1 细胞活检诊断 2005年1月—2007年9月从本院门诊及住院患儿送检标本中分离到SA共2 244株,其中皮肤科门诊诊断为脓疱疮(一种常见的化脓性皮肤病,又名脓疱病、接触传染性脓疱疮、黄水疮,是由化脓性球菌引起的急性炎症性皮肤病)的患者脓疱液标本分离到2 086株;非脓疱疮标本分离到158株,来自其他病区非脓疱疮患儿。 1.2 菌株鉴定试验 取患儿标本接种于血琼脂平板35℃培养16～18 h,根据菌落特征、革兰染色、触酶试验和血浆凝固酶试验及甘露醇试验结果进行菌株鉴定。操作按《全国临床检验操作规程》第3版进行。 1.3 mm厚度的测定 采用纸片扩散(K-B)法,菌液浓度为0.5麦氏单位,使用4 mm厚度的M-H平板。药敏纸片、药敏琼脂均来源于英国Oxoid公司。操作按照产品说明书进行,结果判断参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI/NCCLS)2005年版M100-S15。 1.4 片2g/片贴位置 在做药敏试验时,将常规用的红霉素纸片(15μg/片)、克林霉素纸片(2μg/片)贴在邻近的位置,间距(边沿到边沿)15～26 mm;35℃温箱内培养18～24 h,观察结果。若靠近红霉素纸片侧克林霉素纸片的抑菌环出现扁平区,视为D -试验阳性,即诱导耐药阳性。 1.5 菌株质控结果 实验过程采用大肠埃希菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923和铜绿假单胞菌ATCC 27853标准菌株进行质控,结果完全合格。 1.6 统计分析 采用WHONET 5.3软件对数据进行统计分析,以P0.05为差异有显著性。 2 结果 2.1 mrsa构成比 脓疱疮感染和非脓疱疮感染SA中分别分离到27株和28株MRSA,两组SA中MRSA构成比差异有显著性(χ2=176.36,P0.01)。MRSA标本来源见表1,其中血液、外阴分泌物和呼吸道标本分离的SA中MRSA构成比较高,分别为25.00%、22.73%、18.06%。 2.2 抗菌药物的耐药情况 儿童脓疱疮感染的SA对青霉素、红霉素、克林霉素的耐药率较高,分别为96.2%、83.2%、61.9%,对头孢菌素和加酶抑制剂的复合抗菌药物耐药率均5%;MRSA所占比率不高,为1.29%。非脓疱疮感染的SA对青霉素、红霉素、克林霉素的耐药率分别为97.5%、56.9%、32.9%,对头孢菌素和加酶抑制剂的复合抗菌药物耐药率为14.6%～27.3%,对其他抗菌药物均5%;MRSA分离率为17.72%,未发现耐万古霉素的SA。脓疱疮感染的SA与非脓疱疮感染的SA除对青霉素和万古霉素的耐药率无差异(均P0.05)外,对其他11种抗菌药物的耐药率前者均明显低于后者(均P0.05),2 244株SA对13种抗菌药物的耐药率比较见表2。 2.3 体外试验筛选 MRSA耐药性比甲氧西林敏感的SA(MSSA)明显增加(P0.05)。 MRSA对阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢菌素在体外试验中有一定的敏感性,但都报告耐药。27株脓疱疮感染和28株非脓疱疮感染MRSA的耐药性差异无显著性(P0.05),对万古霉素的敏感率均为100%,对阿米卡星、复方磺胺甲口恶唑的耐药率均5%,详见表3。 2.4 %是家庭经济增长员,对因数少的特殊人群进行了调整 在分离到的2 244株SA中,对红霉素与克林霉素同时耐药的菌株占多数,达54.90%(1 232/2 244);对红霉素耐药而对克林霉素敏感的菌株有432株,出现诱导试验阳性的菌株232株,即红霉素诱导克林霉素耐药菌株占53.70%(232/432)。D -试验结果和可能的基因型见表4。 3 sa与克林激素的耐药机制及其对新生儿医院和继发感染的影响 抗菌药物的广泛应用导致SA耐药水平越来越高,多重耐药株日益增多。本研究中SA对13种抗菌药物的药敏结果显示,儿童脓疱疮感染的SA对青霉素、红霉素、克林霉素的耐药