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poc在临床疾病诊断中的应用
作为临床检验领域的一种新的检验方法,poct(poct)越来越受到重视。最近美国国家临床生化科学院 (NACB) 在其制定的“POCT循证文件”草案中, 将POCT定义为:“在接近病人治疗处, 由未接受临床实验室学科训练的临床人员或者病人 (自我检测) 进行的临床检验, 是在传统、核心或中心实验室以外进行的一切检验”。由于POCT可在多种场合进行, 有大型仪器不具备的时间优势, 满足在医疗、危重病抢救时间上的要求, 可使病人尽早得到诊断治疗, 因此, 在临床疾病诊断应用中得到了迅猛的发展。
1 现代分析技术的应用
近年来POCT的进展主要体现在便携式分析仪器的大量使用, 酶免疫、传感器、生物芯片等现代分析技术的进入和POCT检验应用范围的拓宽, 具体体现如下:
1.1 poct的应用
大量操作简便、报告及时、准确的小型化实验仪器得到开发应用。如小巧的手持血糖仪、测定多项生化指标的手持STAT生化仪等POCT仪器, 逐渐受到处理危重病人的相关临床科室的青睐。因此, 小型POCT测定仪器的发展对POCT技术进步起到了巨大的推动作用。
1.2 poct的检测方法
化学、光学、生物传感器技术, 电化学、酶免疫、免疫层析、免疫荧光等免疫分析技术, 分子生物学等分析技术的应用, 使得以往POCT检测方法中普遍存在的很多问题得到解决或有不同程度改进, 从而使POCT方法成为更为快速、方便、高灵敏度、高特异性、高通量的检验方法。特别是近几年, POCT检测被广泛应用在免疫学试验, 为很多临床疾病的快速诊断提供了有效的辅助手段。就目前的发展趋势来看, 在不远的将来, POCT方法有可能覆盖整个一般小型实验室的所有检测项目。
1.3 容易被医院医疗扩大到医院
医学模式的转变导致医院功能任务发生变化, 由单纯的治疗转向预防、保健、治疗和康复等多项功能, 随之为社会提供全方位的优质服务。医院工作从院内医疗扩大到院外社区, 这就需要简易快速的实验诊断体系。随着老龄化社会的到来, 患慢性疾病 (如糖尿病、冠心病、慢性肾病和肝病等) 的人愈来愈多, 患者不仅希望得到医师的系统诊治, 还需要积极进行自我观察和干预, 而仅为了一个单项指标需要至少半天的时间到医院挂号、开化验单、交费、抽血, 所带来的不便可想而知。上述情况大大促进了POCT市场的快速发展。
2 tat的检验
POCT实际上是缩短标本周转时间 (turn around time, TAT) 的现场检验。因此, 简便快速的检验方法和便携式的小型仪器是其实施的必要条件。如今, 临床化学、免疫测定、血液学和微生物学等检验领域均有适用于检测单份标本的仪器和试剂, 根据不同的测定原理可归类如下:
2.1 免疫试验
2.1.1 胶体金的状态
氯金酸 (HAuCl4) 在还原剂作用下, 可聚合成一定大小的金颗粒, 形成带负电的疏水胶溶液, 由于静电作用而成为稳定的胶体状态, 故称胶体金。免疫金标记技术, 主要有斑点免疫金渗滤法 (DIGFA) 和斑点免疫层析法 (DICA) , 二者都是用胶体金标记单克隆抗体, 可用于快速检测蛋白质类和多肽类抗原, 如激素、心肌肌钙蛋白T (cTnT) 、血清白蛋白、高敏C反应蛋白 (hs-CRP) 及一些病毒, 如乙型肝炎病毒 (HBV) 、丙型肝炎病毒 (HCV) 、艾滋病病毒 (HIV) 抗原和抗体测定。
2.1.2 荧光热量检测系统
新一代POCT仪器不少使用了免疫荧光技术, 通过检测板条上激光激发的荧光, 可同时定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。检测系统由一个荧光读数仪和检测板组成。检测板使用的是层析法, 分析物在移动的过程中形成免疫复合物的形式, 通过检测区域/质控区域的值与分析物不同的浓度获得的定标曲线, 可检测未知样本中分析物的浓度。
2.2 载体上的反应反应
将一种或多种反应试剂, 干燥固定在固体载体上 (纸片、胶片等) , 用被测样品中所存在的液体作反应介质, 被测成分直接与固化于载体上的干试剂进行呈色反应。
2.2.2 干片检测方法
是从感光胶片制作技术移植而来, 将多种反应试剂依次涂布在片基上, 制成干片。采用多层涂膜技术制成的干片, 比干化学纸片平整均匀, 用仪器检测, 可以准确定量。如目前临床使用的干化学分析系统, 可用于大多数血液化学成分, 如蛋白质、糖类、脂类、酶、电解质、尿素氮及一些血药浓度的测定。由于其操作简便、快速, 常用于急诊检验, 也相应推出了一些小型仪器, 可在床边检验, 但干片成本较湿化学法高。
2.3 电化学和计算机技术
一个生物传感器偶联一个特定的生物检测器 (如酶、抗体或核酸探针) 到一个换能器, 用于靶分析物的直接测定, 而无需从基质中分离, 它体现了酶化学、免疫化学、电
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