血栓前状态分子标志物与早期复发性流产的相关性研究.docxVIP

血栓前状态分子标志物与早期复发性流产的相关性研究 复发性自然流产（ssa）的原因非常复杂。除了内政部、遗传因素、免疫因素、感染因素和生殖畸形的原因外，一半以上的sra因素还不清楚。近年来,血栓前状态(prethrombotic state,PTS)与不明原因复发性流产(URSA)的关系日益引起国内外学者的关注。有资料显示:RSA病人底蜕膜、胎盘绒毛及脐带血管内血栓形成,经抗凝治疗后部分患者能获得正常妊娠。因此,国内外许多学者提出了对有复发性流产的患者增加实验室诊断血栓前状态指标的筛查,异常者并尽早预防治疗,以防流产的发生。但目前国内外尚无明确的初筛和诊断围生期孕产妇血栓前状态的实验室诊断指标。本研究希望通过联合检测凝血、抗凝及纤溶指标,即检测复发性流产患者及正常妊娠妇女凝血相关因子(F1+2)、抗凝血因子(AT-Ⅲ、TAT)及纤溶相关因子(D Dimer)在血浆中的变化,以探讨RSA患者中血栓前状态分子标志物的变化规律,寻找RSA血栓前状态早期诊断的实验室诊断指标。 1 材料和方法 1.1 病例选择及年龄 随机收集2007年6月至2007年12月在中山二院不孕不育专科门诊就诊的早期复发性流产未孕者103例(ANP组)及收住在中山二院产前区安胎的早期复发性流产早孕者103例(AEP组)分别为两病例组,年龄22~34岁,平均29.34(S=3.14)岁,以往自然流产次数2~6次。患者均进行流产原因检查:经夫妇外周血染色体检查排除遗传因素、患者阴道分泌物检查及血液Torch检查排除感染因素、性激素检查排除内分泌因素、B超及宫腔镜检查排除生殖器官解剖异常(其中宫腔镜检查为有创性检查,需签具检查同意书)。随机收集同期在中山二院体检中心进行健康体检者40例(NNP组)及B超确诊宫内早孕,在门诊行无痛人流的早孕者40例(NEP组),作为两个对照组,年龄20~34岁,平均28.34(S=2.34)岁,以往无自然流产病史。所有研究对象均无糖尿病、肾脏疾病、甲状腺疾病等内科疾病史,近两个月未使用抗凝或促纤溶药物,未孕者均未服用避孕药物。 1.2 方法 1.2.1 抗凝剂、抗凝剂、单次血浆f 抽取外周静脉血,用0.11 mol/L枸橼酸钠抗凝,静脉血与抗凝剂比例为9:1,立即摇匀,1 500×g离心10 min,收集上层血浆尽快进行F1+2、AT-Ⅲ、TAT、D-Dimer检测。 1.2.2 elasa检测 F1+2、AT-Ⅲ、TAT的试剂盒购于上海西唐科技有限公司,使用宝特酶标仪ELX-800,以ELASA方法检测;D-Dimer的试剂盒购于德国DADE BEHRING,使用Sysmex CA-1500全自动凝血仪,以免疫比浊法检测。 1.3 检测方法及诊断临界值 采用SPSS 11.0统计学软件进行统计分析。因为计量资料不符合正态分布,因此结果采用中位数表示,两组间的比较采用Z检验,依Bonferroni法调整α值为0.008。诊断临界值采用ROC(Receiver Operating Characteristic curve)曲线分析。不同流产次数的3组比较用χ2检验,如有意义则进行两两比较,依Bonferroni法调整α为0.0167。 2 结果 2.1 两组p组的比较 ANP组F1+2、D-Dimer水平显著高于NNP组,两者间差异有显著性(P0.008);ANP组TAT水平高于NNP组,AT-Ⅲ水平低于NNP组,但其差别无统计学意义(P0.008;表1)。 2.1.1 p0.165 随着流产次数增多,血液中F1+2水平升高,3组差异有统计学意义(P0.0167)。再进行两两比较,发现流产3次者F1+2水平高于流产2次者,差别有统计学意义(P0.0167)。流产4次者高于流产3次以上者,差别无统计学意义(P0.0167;表2、3)。 2.1.2 u3000定型价值比较结果见表2 随着流产次数增多,血液中D-Dimer水平升高,3组差异有统计学意义(P0.0167)。再进行两两比较,发现流产3次者D-Dimer水平高于流产2次者,差别有统计学意义(P0.0167),流产4次者高于流产3次以上者,差别无统计学意义(P0.0167;表4、5)。 2.2 比较ap组和nep组各指标的比较 AEP组F1+2、TAT、D-Dimer水平高于NEP组,AT-Ⅲ水平低于NEP组,但其差别无统计学意义(P0.008;表6)。 2.3 最佳筛查界值及最优筛查界值 F1+2判断RSA未孕患者存在血栓前状态的最佳筛查界值为55.11 nmol/L,其ROC曲线下面积(AUC)为0.767,其灵敏度为89.4%,特异度为65.8%(图1)。 2.4 基于状态筛查界值的筛查 D-Dimer判断RSA未孕患者存在血栓前状态的最佳筛查界值为233.50μg/L。其RO