大学课程植物组织培养13植物脱毒--组培ppt课件.pptxVIP

植物脱毒技术 一 植物病毒及植物物脱毒技术 1 植物病毒 2 植物病毒的危害 3 植物脱毒技术概念 4 植物脱毒技术的一般方法 二 茎尖脱毒技术的方法步骤 1 原理 2 基本步骤 3 影响茎尖脱毒效果的因素 三 其它脱毒技术方法介绍 四 脱毒技术的应用 一 植物病毒及植物物脱毒技术 1 植物病毒： A 病毒(virus) 是一类非细胞结构的专性寄生的， 极微 小的分子生物，有核酸和蛋白质组成，以复制繁殖。 B 主要存在于植物细胞内的病毒(类病毒)称为植 物病毒(非系统分类) 。 C 植物病毒形态 在生物界中，植物病毒形态最小，观察病毒需放大 数万倍的电子显微镜，度量病毒大小的尺度为纳米， 其形态有球状、杆状、线条状，少数弹状。 植物病毒结构简单，杆状、线条状的病毒，粒体中间 是螺旋状的核酸链，外面是蛋白质亚基组成的衣壳。 D 植物病毒结构 E 植物病毒的发展简史 1．症状描述期 2．病原研究期 代表人物： Adolf mayer (1882)， Dmitrii Ivanowski (1892)， Martinus Beijernek (1898)。 3．病理学研究期 研究植物病毒的传播介体。 4．生物化学、生物物理学研究期 Stanley (1935) 从TMV汁液中提取出一种蛋白质的晶 体。 Bawden和Pirie (9136) 证实TMV汁液中除蛋白质外， 还有核酸，两者比例为核酸5%、蛋白质95%。 2 植物病毒的危害： A 种类多，范围广，已发现植物病毒有700种。大多数 农作物特别是利用无性繁殖生产的农作物都受到一种 或一种以上病毒感染而且带毒株率高。 Ex.苹果—60%- -100% B 危害程度仅次于真菌病害 C 不易防治，潜隐性危害更大 D 植物病毒的症状类型 症状是认识病毒的第一步，具有诊断价值，其症状类 型有花叶、坏死、畸形。 E 复合侵染和复合症 1．干扰作用 指两种有亲缘关系的病毒侵染同一种植物，其表现的症状 比单一侵染所表现的症状要轻。其中主要是交互保护，指先侵入的病毒 可以保护植物不受另一个病毒的侵染，一般是弱株系诱发对强株系的抗 性。 2．协生作用 两种无亲缘关系的病毒混合侵染后所表现的症状比它们单 独侵染所表现的症状更为严重。 F 植物病毒症状隐潜 病毒侵染植物后不表现症状或难以觉察的症状，但病毒可以在 体内增殖称潜伏侵染。 带毒体 受病毒侵然而不表现症状的植物。 I 感病寄主内部病理变化 (一)筛管、筛板堵塞 (二)组织坏死产生坏死斑 (三)病细胞结构发生变化 (四)内含体的产生 内含体是寄主细胞内的病毒核酸和寄主细胞内的蛋白质、甘糖等物质聚 集在一起形成的一种混合体。其种类有X-体和晶状体。 潜伏侵染 3 植物脱毒技术概念： A 广义：消除包括病毒、真菌、细菌在内的微生物病原体 B 狭义：单指消除植物细胞、组织内的病毒、类病毒 (本节重点为狭义脱毒所涉及内容) 4 植物脱毒技术的一般方法： A 从材料角度分： 茎尖培养脱毒(或顶端分生组织)、珠心胚培养脱毒、 微尖嫁接脱毒、花药培养脱毒、愈伤组织培养脱毒 高温处理 低温处理 病毒唑(1,2,4-三唑-3-酰胺-1-B—D-呋喃糖) 抗病毒血清处理 RNA 合成抑制物(防线菌素D) B 从处理手段角度分： 物理方法脱毒 化学方法脱毒 生物方法脱毒 (该方法可能会遇到的问题是什么？如何解决？) 原理：基本原理是在高于正常的温度下，植物组织中的病毒 可部分或全部失活(钝化)，但是很少或甚至不伤害寄主植物组 A B C 高 温 热处理区 生长区 病毒热死点 植物热死点 高温处理： 织细胞。 无损伤 低 温 应用热处理脱毒也有一定的局限性，主要缺 点在于并非所有病毒都对热处理敏感。 热处理只对那些球状的病毒(如葡萄扇叶病毒、 苹果花叶病毒)或线状的病毒(如马铃薯X、 Y病毒及康乃馨病毒)有效果，而对杆状病 毒(如牛蒡斑驳病毒、千日红病毒)不起作用。 二 茎尖脱毒技术的原理和方法 1 基本原理 (采用茎尖的原理) 利用病毒在植物体内的分布不均匀性，一般情况下，病毒 在植物的顶端分生组织中不存在或只有较低的浓度(胚中也是 这种情况，为什么？) 2病毒分配不均匀性的可能原因： A 物理隔离：分生组织微管系统或胞间连丝不发达，细胞分 裂速度快于病毒侵染速度 B能量竞争 ：病毒核酸和植物细胞分裂时都须要消耗大量的 能量，而分生组织细胞本身很活跃，其DNA合成是 自我提供能量自我复制，这样病毒核酸复制就得不 到足够的能量。 C 存在病毒钝化系统：植物不同部位细胞的防卫系统能力的 差