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瘤背石磺生态繁殖研究 肿瘤背石磺酸是一种重要的营养价值和药物价值的经济贝类。主要分布在中国江、浙江、上海和咸丰交汇处的中国大陆沿海地区的高潮。近年来由于环境污染和人为滥捕,瘤背石磺的自然资源量正在迅速下降,因此迫切需要开展瘤背石磺人工增养殖,以满足市场需求。 自20世纪80年代以来,国内外已对石磺类的外部形态、生殖行为、生态习性、胚胎发育、性腺发育等方面进行了较多的研究,但是由于缺乏对石磺发育至面盘幼虫后发育机制的深入研究,至今无法在室内培育出幼体石磺,制约了石磺增养殖业的发展。其它水产动物的生态繁殖经验表明,通过在适宜的野外条件下或在野外模拟自然繁殖的生态条件下进行生态繁殖,不仅可以获得批量的健康苗种,而且可以降低生产成本。本研究通过在适合瘤背石磺生长繁殖的滩涂湿地进行生态繁殖, 初步研究了瘤背石磺生态繁殖期的性腺发育、交配与产卵、生殖性能、胚胎与幼体发育和繁殖期的其它生态习性,以期为瘤背石磺生态繁殖和资源保护提供理论依据和实践参考。 1 材料和方法 1.1 网围区与发酵猪粪培养 实验于2006年6~10月在长江口北支崇明岛沿岸的芦苇滩涂上进行, 实验地点位于31°35′N、121°51′E。选择适宜瘤背石磺的生长繁殖的芦苇滩涂进行网围, 整个实验区用40目(孔径0.32 mm)的筛绢进行网围,以防石磺逃逸。网围区长20 m,宽20 m, 四周挖深2.5 m、宽4 m的环沟,供涨潮时进排水用(图版-1),网围区中间设直径为5 m的水坑2个,供瘤背石磺亲本栖息和产卵用。2006年6月15日在网围区内提前两周施发酵猪粪100 kg, 培养基础饵料, 供瘤背石磺亲本摄食。 2006年7月5~10日,在崇明北沿芦苇滩涂抓捕规格10~25 g成体瘤背石磺500只放养于网围区内,所有实验亲本均挑选活力较好、体无外伤的个体, 实验结束时间为2006年10月20日。 1.2 瘤背石磺亲水性能的检测 每日测定温度、盐度、湿度和光照,采用北京桑普生化化学有限公司生产的水质测试试剂盒定期测定亚硝酸、氨氮、pH和硫化物含量, 采用YSI 550A便携式溶氧仪测定水体中溶解氧(DO)含量。同时观察亲本性腺发育、交配习性、产卵、胚胎和幼体发育情况,采用三星数码相机拍照,及时进行数据记录。每月上旬和下旬各取瘤背石磺亲本10~15只,活体解剖后观察性腺发育情况和进行食性分析。亲本产卵后,将卵块收集在300目(孔径0.05 mm)筛绢制成的小网围中(规格为 4 m×4 m×2.5 m)进行孵化,幼体孵化后投喂海水小球藻、金藻、微绿球藻和底栖硅藻,每日观察幼体发育情况,小网围置于实验区四周的环沟中(图版-2)。 1.3 塑料网箱的饲养 瘤背石磺亲本性腺发育成熟后, 取交配后的瘤背石磺120只饲养于3个200 L(0.75 m×0.48 m×0.60 m)的塑料水族箱中, 箱底铺15 cm细土,中间形成一个凹潭, 凹潭中间始终保持5 cm的水;每日用盐度为15的海水泼洒于细土上, 保持水族箱内湿度接近于100%。每日投喂玉米粉和螺旋藻粉;每日收集石磺所产胚胎, 洗净后吸干表面水分称重。 1.3.1 单带湿重 准确称取0.1 g左右的卵块,精确统计其数量,计算单卵湿重(μg)=卵块重/卵的个数。 1.3.2 产铅量 统计一个产卵周期内各个水族箱内产卵块总重量, 计算平均每个亲本瘤背石磺的产卵量(个/只)= 卵块总重量/(单卵卵重×亲本个体) 1.3.3 卵径 每个水族箱各挑选100只胚胎,在OLYMPUS显微镜下用目测微尺测量卵径(精确到10 μm),共重复测定3次。 1.3.4 面盘幼虫孵化 每只水族箱各取100只左右的胚胎于500 ml玻璃烧杯中, 烧杯中盛有盐度为15的过滤海水400 ml,微量充气, 每日换水100%, 计算孵化率(%)=面盘幼虫数/卵的个数×100。 2 结果与分析 2.1 温度和光照条件 网围区6~10月份盐度在 2~10之间,涨潮时盐度上升到7~10, 退潮后的盐度仅为2~6;整个实验期间网围区的水温为27~42℃,最高水温发生在7、8月份晴天下午,最高水温通常在40 ℃以上; 网围区的湿度通常在90%~100%;光照在20~1 200 μmol/m2·s; pH值为7.8~9.5,涨潮后pH值略大于涨潮前;实验期间亚硝酸盐始终小于0.1 mg/L,氨氮变化范围在0.05~0.5 mg/L之间,硫化物含量小于0.1 mg/L,水中溶解氧含量在4.0~6.2 mg/L之间。 2.2 两睾丸期蛋白腺和精子数量的变化 瘤背石磺的生殖系统主要包括两性腺、蛋白腺、卵黄腺、雄性副性腺和雌雄交接器等,其中两性腺中既可以产生精子又可以产生卵子。不同性腺发育期的两性腺、蛋白腺和卵黄腺外部形态显著不同, 根据两性腺指数、外观和其它副性腺器官的特征,将石